組成及試劑配制:
1、墨累谷腦炎病毒PCR檢測試劑盒品牌 酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管（含0.4ml滅菌生理鹽水），用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后，密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測，也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標(biāo)本、對照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫(yī)療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本，具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應(yīng)管數(shù)）,振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進行PCR擴增反應(yīng)。
4. PCR擴增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃，反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇：選用FAM通道。

PCⅡ ELISA KitE3泛素蛋白連接酶MIB1抗體Ⅱ型前膠原(PCⅡ)ELISA試劑盒
CTXⅡ ELISA Kit主導(dǎo)控制樣蛋白1抗體Ⅱ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅡ)ELISA試劑盒
COL2α1 ELISA Kit主導(dǎo)控制樣蛋白2抗體Ⅱ型膠原α1(COL2α1)ELISA試劑盒
COL2 ELISA Kit絲裂原活化蛋白激酶6抗體Ⅱ型膠原(COL2)ELISA試劑盒
MHCDQβ1 ELISA Kit磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MST4,MST3,STK25抗體Ⅱ類主要組織相容性復(fù)合體DQβ1(MHCDQβ1)ELISA試劑盒
PLA2G2D ELISA Kit表皮生長因子樣蛋白Megf10抗體ⅡD組磷脂酶A2(PLA2G2D)ELISA試劑盒
PLA2G2A ELISA KitMPP4蛋白抗體ⅡA組磷脂酶A2(PLA2G2A)ELISA試劑盒
PⅠCP ELISA Kit微小染色體維持缺陷蛋白7抗體Ⅰ型前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA試劑盒
PⅠNP ELISA KitE3泛素連接酶MUL1抗體Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)ELISA試劑盒
PCⅠ ELISA Kit纖微絲相關(guān)糖蛋白2抗體Ⅰ型前膠原(PCⅠ)ELISA試劑盒
CTXⅠ ELISA Kit肥大細(xì)胞類糜蛋白酶1抗體Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)ELISA試劑盒
NTXⅠ ELISA Kit甲硝唑單克隆抗體Ⅰ型膠原交聯(lián)氨基端肽(NTXⅠ)ELISA試劑盒
COL1α2 ELISA Kit線粒體核糖體蛋白L12抗體Ⅰ型膠原α2(COL1α2)ELISA試劑盒
COL1α1 ELISA Kit線粒體核糖體蛋白L39Ⅰ型膠原α1(COL1α1)ELISA試劑盒
COL1 ELISA Kit丙酮酸脫氫酶激酶1抗體Ⅰ型膠原(COL1)ELISA試劑盒
MHCG ELISA Kit絲裂原活化的蛋白激酶p38β抗體Ⅰ類主要組織相容性復(fù)合體G(MHCG)ELISA試劑盒
MHCE ELISA Kit核基質(zhì)蛋白3抗體Ⅰ類主要組織相容性復(fù)合體E(MHCE)ELISA試劑盒
MHCC ELISA Kit組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體Ⅰ類主要組織相容性復(fù)合體C(MHCC)ELISA試劑盒
SRP9 ELISA Kit組織相容性復(fù)合體蛋白2抗體9kDa信號識別顆粒(SRP9)ELISA試劑盒
NUP98 ELISA Kit轉(zhuǎn)化因子樣蛋白4抗體98kDa核孔蛋白(NUP98)ELISA試劑盒
NUP93 ELISA KitNADH復(fù)合體5抗體93kDa核孔蛋白(NUP93)ELISA試劑盒
HSP90β1 ELISA Kit肌微管素1抗體90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)ELISA試劑盒
HSP90αB1 ELISA Kit髓細(xì)胞性白血病蛋白1抗體90kDa熱休克蛋白αB1(HSP90αB1)ELISA試劑盒
HSP90αA1 ELISA Kit磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)ELISA試劑盒
8-OHdG ELISA Kit組織相容性復(fù)合體2抗體8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒
OGG1 ELISA Kit磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體8-羥基鳥嘌呤糖苷酶1(OGG1)ELISA試劑盒
NUP88 ELISA Kit甲基化CpG結(jié)合蛋白2抗體88kDa核孔蛋白(NUP88)ELISA試劑盒
NUP85 ELISA Kit磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體85kDa核孔蛋白(NUP85)ELISA試劑盒
DHCR7 ELISA KitNADH復(fù)合體6抗體7-脫氫膽固醇還原酶(DHCR7)ELISA試劑盒

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。