組成及試劑配制:
1、青蟹雙順反子病毒PCR檢測試劑盒廠家酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管（含0.4ml滅菌生理鹽水），用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后，密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測，也可保存于-20℃待測。
【檢驗(yàn)方法】
1.標(biāo)本、對照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫(yī)療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本，具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應(yīng)管數(shù)）,振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測在60℃，反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇：選用FAM通道。

BDH1 ELISA Kit小腦癥基因1/認(rèn)知相關(guān)蛋白抗體3-羥基丁酸脫氫酶1(BDH1)ELISA試劑盒
NUP37 ELISA Kit鋅指蛋白60抗體37kDa核孔蛋白(NUP37)ELISA試劑盒
NUP35 ELISA Kit肌球蛋白6抗體35kDa核孔蛋白(NUP35)ELISA試劑盒
BPNT1 ELISA Kit肌肉素抗體3',5'-二磷酸核苷酸酶1(BPNT1)ELISA試劑盒
ADO ELISA Kit代謝型谷氨酸受體-3抗體2-氨基乙硫醇雙加氧酶(ADO)ELISA試劑盒
HSPB1 ELISA Kit促代謝型谷氨酸受體2+3抗體27kDa熱休克蛋白(HSPB1)ELISA試劑盒
26S-PSM ELISA Kit促代謝型谷氨酸受體1+5抗體26S-蛋白酶體(26S-PSM)ELISA試劑盒
HVD3 ELISA KitMHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)合物MHCIa抗體25-羥基維生素D3(HVD3)ELISA試劑盒
DHCR24 ELISA Kit肌肉特異性環(huán)指蛋白2抗體24-脫氫膽固醇還原酶(DHCR24)ELISA試劑盒
NUP214 ELISA Kit肌肉特異性環(huán)指蛋白3抗體214kDa核孔蛋白(NUP214)ELISA試劑盒
NUP210 ELISA Kit磷酸化原癌基因c-Met相關(guān)酪氨酸激酶抗體210kDa核孔蛋白(NUP210)ELISA試劑盒
20S-PSM ELISA Kit絲裂原活化蛋白激酶13抗體20S-蛋白酶體(20S-PSM)ELISA試劑盒
NUP205 ELISA Kit多纖毛素蛋白抗體205kDa核孔蛋白(NUP205)ELISA試劑盒
OAS3 ELISA Kit肌管素相關(guān)蛋白8抗體2',5'-寡腺苷酸合成酶3(OAS3)ELISA試劑盒
OAS2 ELISA Kit巨噬細(xì)胞甘露糖受體2抗體2',5'-寡腺苷酸合成酶2(OAS2)ELISA試劑盒
OAS1 ELISA Kit細(xì)胞周期G1的相互作用蛋白抗體2',5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)ELISA試劑盒
2,3-BPG ELISA Kit主導(dǎo)控制樣蛋白3抗體2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)ELISA試劑盒
NUP188 ELISA Kit絲裂原活化蛋白激酶MKK3抗體188kDa核孔蛋白(NUP188)ELISA試劑盒
17-OHP ELISA KitMYSM1抗體17-羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒
HSD17β3 ELISA Kit單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體17-β-羥基類固醇脫氫酶3(HSD17β3)ELISA試劑盒
S17αH ELISA Kit微管相關(guān)蛋白1A抗體17-α-羥化酶(S17αH)ELISA試劑盒
NUP160 ELISA Kit中期因子/肝素結(jié)合生長因子抗體160kDa核孔蛋白(NUP160)ELISA試劑盒
HPGD ELISA Kit鹽皮質(zhì)激素受體抗體15-羥基前列腺素脫氫酶(HPGD)ELISA試劑盒
NUP155 ELISA Kit促黑細(xì)胞激素α抗體155kDa核孔蛋白(NUP155)ELISA試劑盒
NUP153 ELISA KitMyc基因相關(guān)X因子抗體153kDa核孔蛋白(NUP153)ELISA試劑盒
NUP133 ELISA Kit細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體133kDa核孔蛋白(NUP133)ELISA試劑盒
12-HETE ELISA KitNFKB激活蛋白1抗體12-羥基二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA試劑盒
11-DH-TXB2 ELISA Kit磷酸化Myc基因相關(guān)X因子抗體11-去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA試劑盒
HSD11β3 ELISA Kit亞甲基四氫葉酸還原酶MTHFR抗體11-β-羥基類固醇脫氫酶3(HSD11β3)ELISA試劑盒
HSD11β2 ELISA KitMEK1/MAPKK1抗體11-β-羥基類固醇脫氫酶2(HSD11β2)ELISA試劑盒

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。