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貨號(hào)	GOY-01X1416

使用方法：

收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱	小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞
規(guī)格	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
分類	原代細(xì)胞
貨號(hào)	GOY-01X1416

商品介紹：

名稱 小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞

2.組織來(lái)源：陰道組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞分離自陰道組織；陰道位于膀胱、尿道和直腸之間，是一個(gè)富有彈性的管狀器官。它在人類生殖過程中具有多種生理功能，是連接子宮與外陰的通道，是排出月經(jīng)血、娩出嬰兒的必經(jīng)之路，也是一個(gè)重要的性交器官。陰道壁按組織學(xué)由外到內(nèi)分三層，即黏膜層、肌層和外膜。1）黏膜層由上皮和固有膜組成。上皮較厚，為復(fù)層鱗狀上皮，從基底層到表層由基底層、旁基底層、中間層和表層組成。沒有角化層。陰道粘膜的基底層呈細(xì)波紋狀起伏。2）肌層由平滑肌組織構(gòu)成，肌束排列不規(guī)則，縱行和環(huán)形互相交錯(cuò)。肌束間有較多的結(jié)締組織和彈性纖維。陰道外口有環(huán)形的橫紋肌稱括約肌。3）外膜層為纖維膜，由結(jié)締組織構(gòu)成，內(nèi)含豐富的彈性纖維、靜脈叢、淋巴管和神經(jīng)。大鼠陰道壁成纖維細(xì)胞主要分離自外膜層，成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。

5.方法簡(jiǎn)介：

()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號(hào)CM-R325

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳2-3代左右；2代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓脫落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

遠(yuǎn)志（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Polygalacic acid A-375(人惡性黑色素瘤細(xì)胞)PBS

曲格列汀琥珀鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Trelagliptin succinate；SYR-472 Hela S3(人宮頸細(xì)胞)小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞（EGFP標(biāo)記）

蘭雪醌,白花丹醌,白花丹素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品 Plumbagin 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeJAR(人胎盤絨毛膜細(xì)胞)

對(duì) 訂購(gòu)|咨詢規(guī)格： 10

小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞多價(jià)蛋白胨-酵母膏 (PY) 培養(yǎng)基進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Poly Peptone Yeast Extract Medium用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))250兔淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Cooked Meat Medium Base加入牛肉粒,用于肉毒梭菌及厭氧梭狀芽孢桿菌的檢驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))250兔粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)免疫試劑盒*直銷

皰肉牛肉粒進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Dried Meat Particle加入皰肉基礎(chǔ)中，配成皰肉培養(yǎng)基100兔可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Egg Yolk Agar Base用于肉毒梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）250兔抗糖蛋白抗體(GP)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

含鐵牛奶培養(yǎng)基進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的牛奶發(fā)酵試驗(yàn)250兔抗平滑肌抗體(ASMA) 免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

梭菌鑒別瓊脂(DCA)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Differentia Clostridial Agar用于干燥食品的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)(MERCK方法)250兔抗凝血III(SERPINC1)免疫試劑盒*直銷

強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂(DRCA)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Differentia Reinforced Clostridial Agar用于食品和其它物質(zhì)中梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)(MERCK方法)250兔抗腦組織抗體(ABAb)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

強(qiáng)化梭菌瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Reinforced Clostridium Agar用于梭菌的分離培養(yǎng)(MERCK方法)250兔抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基(RCM)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Reinforced Clostridium Medium用于梭菌的分離培養(yǎng)(Merck方法)250兔抗單核細(xì)胞抗體(AMA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

TSN 瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)TSN Agar用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)(Merck方法)250兔膠原吡啶交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒*直銷