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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>其它系列>> 蘋(píng)果酸合酶(MS)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6600 |
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操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | |
規(guī)格 | 50管/48樣 |
檢測(cè)方法 | 可見(jiàn)分光光度法 |
貨號(hào) | GOY-01S6600 |
商品介紹:
測(cè)定意義
蘋(píng)果酸合酶(MS,EC 4.1.3.2)是屬于轉(zhuǎn)移酶中?;D(zhuǎn)移酶的一類(lèi),主要存在于植物和微生物中。MS是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,在MS催化下乙醛酸與乙酰反應(yīng)生成蘋(píng)果酸。
測(cè)定原理:
MS催化乙酰CoA和乙醛酸產(chǎn)生蘋(píng)果酸,同時(shí)生成,使無(wú)色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB,在 412nm處有特征吸光值。
需自備的儀器和用品:
酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰、和蒸餾水
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
納米鋁粉 99.9% metals basis:,粒徑:50nm三(2-呋喃基)膦 99%GnRH ELISA Kit 大鼠促性腺釋放
納米鐵粉 99.9%,50nm4-(三氟甲氧基)苯甲酸 97%LTB4 ELISA Kit 大鼠白三烯B4
納米鐵粉 99.9%,80nm3-(三氟甲基)芐 98%LIFR ELISA Kit 大鼠白血病抑制因子受體
納米鉬粉 比表面積3-8m2/g, 粒度80nm,99.9%4-(三氟甲基) 99%EGF ELISA Kit 大鼠因子
納米鎳粉 比表面積10m2/g-60m2/g, 粒度20nm-100nm,99.9%1-(3-三氟甲基)苯基哌 98%iFABP ELISA Kit 大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白
銀 99.5%,60-120nm4-(三氟甲基)苯酸 98%TE ELISA Kit 大鼠端粒
鎢 比表面積10-15m2/g,粒度20nm-100nm,99.9%三(2-噻吩基)膦 98+%MMP-5 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白5
4-叔丁基苯甲 97%四乙基四氟酸銨 99%MMP-4 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白4
蘋(píng)果酸合酶(MS)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒二烯新戊二酯 89%Anti-TGM3/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)谷氨酰3抗體IgG豬硫皮膚素差向異構(gòu)(DSE)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
烯鈉 99%Anti-Thioredoxin 1/FITC 熒光素標(biāo)記硫氧還蛋白抗體IgG豬封閉蛋白1(CLDN1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
烯十八烷酯 96%Anti-Thymosin Alpha-1/FITC 熒光素標(biāo)記 α-1抗體IgG豬核孔蛋白214kda(NUP214)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
三乙二二烯酯 95%,stabilized with 60-100 ppm MEHQAnti-Tie1/FITC 熒光素標(biāo)記血管生成素-1受體抗體IgG豬β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
二烯四乙二酯 包含~0.006% 對(duì)二酚 穩(wěn)定劑, 90%Anti-Tie2/FITC 熒光素標(biāo)記上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨激2IgG豬泛素蛋白連接E3成分N-識(shí)別蛋白4 (UBR4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
三羥烷三烯酯 85%,含100ppm MEHQ穩(wěn)定劑Anti-Phospho-Tie2 (Tyr992) /FITC 熒光素標(biāo)記化血管生成素受體2抗體IgG豬組織蛋白L(CTSL)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
烯四酯 98%,含500ppm單MEHQ穩(wěn)定劑Anti-Phospho-Tie2 (Ser1119) /FITC 熒光素標(biāo)記化血管生成素受體2抗體IgG豬白介素3介導(dǎo)核因子(NFIL3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
烯三氟乙酯 包含 100 ppm MEHQ 穩(wěn)定劑,98%Anti-TIEG1/KLF10/FITC 熒光素標(biāo)記TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答因1抗體IgG豬胱天蛋白7(P7)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2,2,3,3-四氟烯酯 97%,含50ppm BHT穩(wěn)定劑Anti-RALDH2/FITC 熒光素標(biāo)記視黃脫氫2型抗體IgG豬胃泌素34(GT-34)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
烯四酯 97%anti-RARRES1/TIG1/FITC 熒光素標(biāo)記視黃受體應(yīng)答蛋白1抗體IgG豬泛素蛋白(Ub)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
二烯鋅 95%Anti-TIGAR humen/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人TIGAR蛋白抗體IgG豬絲氨蛋白(PRSS)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
甘氨 AR,99.5-100.5%anti-Rarres2/TIG2/FITC 熒光素標(biāo)記視黃受體應(yīng)答蛋白2抗體IgG豬早期生長(zhǎng)應(yīng)答蛋白3(EGR3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
3--2- 99%Anti-Rarres3/TIG3/Chemerin/FITC 熒光素標(biāo)記視黃受體應(yīng)答蛋白3抗體IgG豬蛋白激Cα相互作用蛋白α1(PICK1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
6--2-硝 99%Anti-rInsulin /HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記抗抗體IgG豬角蛋白20(CK20/KRT20)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
4--2-硝 99%Anti-rInsulin /FITC 熒光素標(biāo)記抗抗體IgG豬游離睪酮(F-TESTO)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
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