中文名稱：OverExpress C43(DE3) 感受態(tài)細胞100ul*10說明書
規(guī)格：100ul*10
用途：生化試劑。（用于科研試驗研究）  
儲存條件: -70℃保存，必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀） 干冰運輸，單加10kg干冰費
單位: 袋
使用說明：
1． OverExpress C43(DE3) 感受態(tài)細胞100ul*10說明書取100 μl感受態(tài)細胞置于冰浴中融化。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30min。
3． 42℃熱擊45sec，然后快速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3min，該過程不要搖動離心管。
4．每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床， 150 rpm振蕩培養(yǎng)45～60min使菌體復(fù)蘇。
5． 根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含相應(yīng)抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12~16h。

培養(yǎng)方法：
OverExpress C43(DE3) 感受態(tài)細胞100ul*10說明書收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況，如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
培養(yǎng)實驗又要開始了，科研工作者又該忙碌了，大家可能都在尋找適合自己的細胞，不用急，我們幫您掌舵，讓您滿意！
傳代方法：細胞*匯合時，倒掉舊液，加入消化液（0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA）2ml消化，顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉胰酶，加培養(yǎng)基混勻分瓶，T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml，T75瓶加培養(yǎng)基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培養(yǎng)。

ELISA Kit for Human Cytokine receptor common subunit gamma

96T78-5000 pg/mL人白介素1受體關(guān)聯(lián)激酶3(IRAK-3)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Interleukin-1 receptor-associated kinase 3

96T0.156-10 ng/mL人整合素α5(ITA5)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Integrin alpha-5

96T31.2-2000 pg/mL人紅蛋白(Protein Red)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Protein Red

96T78-5000 pg/mL人磷脂酰肌醇-3,4,5-六磷銨-磷酸酶1(SHIP1)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Phosphatidylinositol-3, 4, 5-trisphosphate 5-phosphatase 1

96T15.6-1000 pg/mL人干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白10(IFM10)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Interferon-induced transmembrane protein 10

96T0.156-10 ng/mL人乙酰乳酸合酶樣蛋白(Acetolactate synthase-like protein)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Acetolactate synthase-like protein

96T15.6-1000 pg/mL人干擾素α2(IFN-alpha-2)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Interferon alpha-2
OverExpress C43(DE3) 感受態(tài)細胞100ul*10說明書Asp2人胚胎腎細胞轉(zhuǎn)化細胞；FC33

人胚腎細胞（亞系克隆）；FIP293

穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞；293E

表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞；293ET

表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞；293KB

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株；293 001A

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株；293 001B

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株；293sars181A

人晶體上皮細胞永生系；SRA01/04（HLE）

人胚腎細胞；293FT
操作方法：
一 、OverExpress C43(DE3) 感受態(tài)細胞100ul*10說明書熱激轉(zhuǎn)化法
1.    從-80℃冰箱取出感受態(tài)細胞冰浴融化后，吸取100μl感受態(tài)細胞轉(zhuǎn)移到-20℃過夜預(yù)冷的搖菌管中，加入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物，輕輕混勻，冰浴30分鐘。
2.    42℃水浴熱激60秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，該過程不要搖動搖菌管。
3.    向搖菌管中加入900μl 37℃溫浴的SOC或LB（SOC培養(yǎng)基可提高2-3倍轉(zhuǎn)化效率），37℃、180rpm、45分鐘復(fù)蘇菌種。
4.    根據(jù)實驗要求（質(zhì)粒，重組連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化），吸取不同體積已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞加到含相應(yīng)抗生素的LB瓊脂培養(yǎng)基上，將細胞均勻涂開。將平板置于37℃至液體被吸收，倒置平       板，37℃過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
二、10分鐘快速轉(zhuǎn)化法                             
注：在使用卡那霉素，四環(huán)素等作為篩選抗性時，需要在SOC培養(yǎng)基中復(fù)蘇以提高轉(zhuǎn)化效率，當使用氨芐青霉素作為篩選抗性時，該步驟可以省略。感受態(tài)細胞-DNA混合物在冰上孵育5-10分鐘后加入4倍體積的37℃溫浴的SOC培養(yǎng)基，在37℃ 180rpm孵育1小時，然后轉(zhuǎn)移到37℃預(yù)熱的LB培養(yǎng)基上。
1. 提前15分鐘將用到的篩選培養(yǎng)基平板拿到37℃預(yù)熱。
2. DH 5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA并用手EP管底輕輕混勻，冰中靜置5分鐘。
3. 用200μl槍將感受態(tài)細胞-DNA混合物轉(zhuǎn)移到已經(jīng)37℃預(yù)熱的LB培養(yǎng)基上，涂均勻，表面無水漬。
4. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。