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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>感覺態(tài)細(xì)胞>>克隆感受態(tài)細(xì)胞>> DB3.1 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5說明書
BW25113 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50圖片
BW25113 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10規(guī)格
MG1655 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50品牌
MG1655 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書
JM330 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50圖片
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 否 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 其他 |
中文名稱:Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*20說明書
規(guī)格:100ul*20
用途:生化試劑。(用于科研試驗(yàn)研究)
儲(chǔ)存條件: -70℃保存,必須加干冰運(yùn)輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個(gè)月。
外觀:(性狀) 干冰運(yùn)輸,單加10kg干冰費(fèi)
單位: 袋
使用說明:
1. Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*20說明書取100 μl感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中融化。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30min。
3. 42℃熱擊45sec,然后快速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3min,該過程不要搖動(dòng)離心管。
4.每個(gè)離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床, 150 rpm振蕩培養(yǎng)45~60min使菌體復(fù)蘇。
5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12~16h。
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操作方法:
1.DB3.1 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5說明書取100μl冰上融化的DH5α感受態(tài)細(xì)胞,加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB),混勻后37℃,200rpm復(fù)蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)
抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | DB3.1 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5說明書 |
規(guī)格 | 50ul*5 |
保存條件 | -80℃ 六個(gè)月 |
注意事項(xiàng):
1.DB3.1 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5說明書感受態(tài)細(xì)胞在冰上融化。
2.混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
ELISA Kit for Human Bactericidal permeability-increasing protein
96T15.6-1000 pg/mL人β淀粉樣蛋白42(Beta-amyloid protein 42)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Beta-amyloid protein 42
96T78-5000 pg/mL人骨形成蛋白10(BMP-10)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Bone morphogenetic protein 10
96T0.156-10 ng/mL人自噬蛋白1(BECN1)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Beclin-1
96T0.312-20 ng/mL人癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Breast cancer type 1 susceptibility protein
96T15.6-1000 pg/mL人β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Beta-endorphin
96T31.2-2000 pg/mL人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Bone morphogenetic protein 7
96T78-5000 pg/mL人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Apoptosis regulator Bcl-2
DB3.1 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5說明書96T1.56-100 pmol/mL人肌聯(lián)蛋白(Titin)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Titin
96T15.6-1000 pg/mL人骨骼肌快肌肌鈣蛋白T Ⅲ型(TNNT3)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Troponin T, fast skeletal muscle
96T0.312-20 ng/mL人尿液三葉因子3(TFF-3)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Trefoil factor 3
96T0.625-40 ng/mL人β微管蛋白3(TUBB3)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Tubulin beta-3 chain
96T0.312-20 ng/mL人腫瘤壞死因子受體超族成員13B ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B
96T0.312-20 ng/mL人細(xì)胞質(zhì)硫氧還蛋白還原酶1(TR)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Thioredoxin reductase 1, cytoplasmic
96T0.312-20 ng/mL人酪氨酸羥化酶(TH)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Tyrosine 3-monooxygenase
96T1.56-100U/mL人轉(zhuǎn)錄因子4(TCF4/ITF2)ELISA試劑盒人
培養(yǎng)方法:
Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*20說明書收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況,如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)又要開始了,科研工作者又該忙碌了,大家可能都在尋找適合自己的細(xì)胞,不用急,我們幫您掌舵,讓您滿意!
傳代方法:細(xì)胞*匯合時(shí),倒掉舊液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉胰酶,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
ELISA Kit for Human Apolipoprotein C-II
96T78-5000 ng/mL人載脂蛋白B(Apo-B)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Apolipoprotein B-100
96T0.312-20 ng/mL人β抑制蛋白2(ARRB2)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Beta-arrestin-2
96T1.56-100 ng/mL人金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1(ADAMTS1) ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1
96T0.156-10 ng/mL人金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白7(ADAMTS7)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 7
96T0.156-10 ng/mL人12-脂氧化酶/脂加氧酶(LOX-12)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Arachidonate 12-lipoxygenase, 12S-type
96T1.56-100 ng/mL人載脂蛋白A4(apo-A4)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Apolipoprotein A-IV
96T6.25-400 U/L人抗頂體蛋白抗體(ACR)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Acrosin
Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*20說明書96T1.56-100 ng/mL人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(PSPA)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Pulmonary surfactant-associated protein A1
96T15.6-1000 ng/mL人抗凝血酶III(ATIII)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Antithrombin-III
96T1.56-100 ng/mL人克拉拉細(xì)胞磷脂結(jié)合蛋白(CC10)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Uteroglobin
96T1.56-100 ng/mL人素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Pigment epithelium-derived factor
96T3.12-200 ng/mL人骨粘連蛋白/骨連接素(ON)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human SPARC
96T0.156-10 ng/mL人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Serpin A12
96T0.156-10 ng/mL人Slit2 ELISA試劑盒人
ELISA Kit for Human Slit homolog 2 protein
96T1.56-100 ng/mL人Smad1 ELISA試劑盒人
操作方法:
一 、Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*20說明書熱激轉(zhuǎn)化法
1. 從-80℃冰箱取出感受態(tài)細(xì)胞冰浴融化后,吸取100μl感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到-20℃過夜預(yù)冷的搖菌管中,加入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物,輕輕混勻,冰浴30分鐘。
2. 42℃水浴熱激60秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,該過程不要搖動(dòng)搖菌管。
3. 向搖菌管中加入900μl 37℃溫浴的SOC或LB(SOC培養(yǎng)基可提高2-3倍轉(zhuǎn)化效率),37℃、180rpm、45分鐘復(fù)蘇菌種。
4. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求(質(zhì)粒,重組連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化),吸取不同體積已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加到含相應(yīng)抗生素的LB瓊脂培養(yǎng)基上,將細(xì)胞均勻涂開。將平板置于37℃至液體被吸收,倒置平 板,37℃過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
二、10分鐘快速轉(zhuǎn)化法
注:在使用卡那霉素,四環(huán)素等作為篩選抗性時(shí),需要在SOC培養(yǎng)基中復(fù)蘇以提高轉(zhuǎn)化效率,當(dāng)使用氨芐青霉素作為篩選抗性時(shí),該步驟可以省略。感受態(tài)細(xì)胞-DNA混合物在冰上孵育5-10分鐘后加入4倍體積的37℃溫浴的SOC培養(yǎng)基,在37℃ 180rpm孵育1小時(shí),然后轉(zhuǎn)移到37℃預(yù)熱的LB培養(yǎng)基上。
1. 提前15分鐘將用到的篩選培養(yǎng)基平板拿到37℃預(yù)熱。
2. DH 5α感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA并用手EP管底輕輕混勻,冰中靜置5分鐘。
3. 用200μl槍將感受態(tài)細(xì)胞-DNA混合物轉(zhuǎn)移到已經(jīng)37℃預(yù)熱的
LB培養(yǎng)基上,涂均勻,表面無水漬。
4. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
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