實(shí)驗(yàn)操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。

b．立即在無菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞

2.組織來源：脊髓組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞分離自脊髓組織；脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu)，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護(hù)；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對(duì)的神經(jīng)，分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個(gè)H形（蝴蝶型）灰質(zhì)區(qū)，主要由神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)成；在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū)，主要由有髓神經(jīng)纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對(duì)的神經(jīng)（稱為脊神經(jīng)）分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動(dòng)的低級(jí)中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié)，31對(duì)脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，簡稱膠質(zhì)細(xì)胞，是神經(jīng)組織中除神經(jīng)元以外的另一大類細(xì)胞，也有突起，但無樹突和軸突之分，廣泛分布于中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)。在哺乳類動(dòng)物中，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元的細(xì)胞數(shù)量比例約為10：1。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞主要有星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞（與前者合稱為大膠質(zhì)細(xì)胞）和小膠質(zhì)細(xì)胞等。傳統(tǒng)認(rèn)為膠質(zhì)細(xì)胞屬于結(jié)締組織，其作用僅是連接和支持各種神經(jīng)成分，其實(shí)神經(jīng)膠質(zhì)還起著分配營養(yǎng)物質(zhì)、參與修復(fù)和吞噬的作用，在形態(tài)、化學(xué)特征和胚胎起源上都不同于普通結(jié)締組織。

5.方法簡介：

()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞采用膠原酶-聯(lián)合消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)GC（Galactocerebroside）免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號(hào)CM-R238

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性不增殖；不傳代

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時(shí)試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

1g 硫酸葡聚糖 Dextran Sulfate 室溫

2 ug pIRES2-EGFP pIRES2-EGFP 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

萋-尼氏染色液  5ml*6

1瓶 LL/2(LLC1)細(xì)胞株 LL/2(LLC1) 低溫運(yùn)輸和保存

菌落總數(shù)檢測(cè)培養(yǎng)基  

100mg 膠原Ⅳ型 Collagenase Type Ⅳ   4℃保存

250mL Succinate Buffer（琥珀酸緩沖液）,0.2M,pH5.0   Succinate Buffer,0.2M,pH5.0   常溫保存

50次 石蠟包

大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞氧化亞鐵硫桿菌培養(yǎng)基 英文名稱：Thiobacillus Ferrooxidans Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠Toll樣受體5(TLR-5)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

可溶性淀粉瓊脂 英文名稱：Soluble Starch Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)免疫試劑盒*直銷

淀粉水解培養(yǎng)基 英文名稱：The Hydrolysis of Starch Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠Tau蛋白免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基 英文名稱：Silicate Bacteria Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠Smad7 免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

GVC增菌液 英文名稱：GVC Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠Smad1 免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

BSSA培養(yǎng)基 英文名稱：BSSA Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠Slit2 免疫試劑盒*直銷

胰蛋白胨酵母膏葡萄糖肉湯 英文名稱：Tryptone-Yeast Extract-Glucose Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠SCAF11蛋白(SFRS2IP/P11)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

Casman瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：Casman Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A8/A9復(fù)合物(S100A8/A9)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

利茲不動(dòng)桿菌培養(yǎng)基 英文名稱：Leeds Acinetobacter Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠S100蛋白(S-100)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

無氮培養(yǎng)基 英文名稱：Nitrogen-free Culture-medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠S100-B蛋白(S100B)免疫試劑盒*直銷