當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>其它系列>> 脂質(zhì)過氧化物(LPO)微量法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6411 |
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測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6411 |
商品介紹
測定意義 脂質(zhì)過氧化是動植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過程,脂質(zhì)過氧化物(LPO)是脂質(zhì)過氧化過程的產(chǎn)物,即ROS與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關(guān)的多不飽和脂肪酸的側(cè)鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過氧化反應(yīng)形成LPO,使細(xì)胞膜的流動性和通透性發(fā)生改變,最終導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變。因此,LPO常被作為機(jī)體氧化應(yīng)激的一種指標(biāo),與某些疾病的病理過程,如腫瘤、化學(xué)中毒、感染、炎 癥、自身免疫疾病、動脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,以及衰老等生理過程密切相關(guān)。 測定原理: LPO在酸性條件下加熱,產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物MDA,MDA與硫代酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在535nm有最大吸收峰。 需自備的儀器和用品: 分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
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Anti-phospho C-Met/pHGFR(pTyr1365)/FITC 熒光素標(biāo)記抗化原癌因c-Met抗體IgG綿羊胞漿蛋白1(STMN1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
Anti-phospho-c-Jun/AP-1(pThr91/pThr93)/FITC 熒光素標(biāo)記抗化原癌因c-Jun抗體IgG綿羊表面膜免疫球蛋白D(mIgD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
Anti-phospho-c-Jun (Ser243) /FITC 熒光素標(biāo)記化原癌因c-Jun抗體IgG綿羊胸腺依賴性抗原(TD-Ag)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
Anti-phospho-c-Jun (Thr93) /FITC 熒光素標(biāo)記化原癌因c-Jun抗體IgG綿羊白介素8(IL-8)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
Anti-phospho-c-Jun (Ser63) /FITC 熒光素標(biāo)記化原癌因c-Jun抗體IgG綿羊白分化抗原CD40配體(CD40L/TNFSF5)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
Anti-phospho-MEK1/MAPKK1(pSer298)/FITC 熒光素標(biāo)記抗化絲裂原活化蛋白激激1抗體IgG綿羊嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員1(EAR1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
Anti-phospho Histone H1,4(pSer27)/FITC 熒光素標(biāo)記抗化組蛋白H1,4樣蛋白抗體IgG綿羊血管緊張素II (ANG II)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
Anti-phospho c-kit/SCFR/CD117(pTyr936)FITC 熒光素標(biāo)記抗化原癌因c-kit抗體IgG綿羊去唾液糖蛋白受體2(ASGR2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
Anti-Phospho-c-Kit (Tyr703) /FITC 熒光素標(biāo)記化原癌因c-kit抗體IgG綿羊粘蛋白21(MUC21)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
Anti-Phospho-c-Kit (Tyr719) /FITC 熒光素標(biāo)記化原癌因c-kit抗體IgG綿羊成纖維生長因子受體4(FGFR4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
Anti-Phospho-FAK (Tyr397) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化粘著斑激抗體IgG綿羊肌球蛋白重鏈10(MYH10)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
Anti-P-HP1/FITC 熒光素標(biāo)記抗異染色質(zhì)蛋白1化抗體(果蠅)IgG綿羊免疫球蛋白A Fc段受體(FcαR/CD89)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
Anti-P-HP1/FITC 熒光素標(biāo)記抗異染色質(zhì)蛋白1化抗體(果蠅)IgG綿羊粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
Anti-Phospho-HP1 gamma (Ser83) /FITC 熒光素標(biāo)記化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體IgG綿羊S轉(zhuǎn)移θ2(GSTθ2/GSTt2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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