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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)可見分光光度法

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更新時(shí)間:2022-04-27 10:56:33瀏覽次數(shù):208次

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國(guó)產(chǎn)貨號(hào) GOY-01S6644
?;D(zhuǎn)移酶(AAT)可見分光光度法檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:AKT蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次
AKT蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 5次
AKT蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒 25次
細(xì)胞P38蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒 10/20次
載玻細(xì)胞P38蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 10/20次
冰凍切組織P38蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 10/20次
石蠟切組織P38蛋白表達(dá)熒

28.png

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

?;D(zhuǎn)移酶(AAT)可見分光光度法檢測(cè)試劑盒

規(guī)格

25管/24樣

檢測(cè)方法

可見分光光度法

貨號(hào)

GOY-01S6644

商品介紹:

測(cè)定意義

AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族,主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種酰基化和去?;磻?yīng),在基因表達(dá)、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)中具有重要作用。

測(cè)定原理:

AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙?;蕉〈?,釋放的CoA還原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,測(cè)定412 nm吸光度增加速率可計(jì)算AAT活性。

自備儀器和用品:

研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血35ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔510分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

Pseudozyma rugulosa泛素C末端水解L1檢測(cè)試劑盒

Pseudozyma rugulosa芳香族L-酸脫羧檢測(cè)試劑盒

Pseudozyma rugulosa肥大類胰蛋白檢測(cè)試劑盒

Rhodotorula glutinis肥胖抑制素檢測(cè)試劑盒

Candida tropicalis肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A檢測(cè)試劑盒

Pseudozyma shanxiensis肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B檢測(cè)試劑盒

Pseudozyma hubeiensis肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C檢測(cè)試劑盒

Cryptococcus flavus肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D檢測(cè)試劑盒

酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)可見分光光度法檢測(cè)試劑盒亮藍(lán) 85%Anti-mTOR/FITC  熒光素標(biāo)記雷帕霉素靶蛋白抗體IgG豬脫氫表雄酮硫酯(DHEA-S)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

鹽  95%Anti-mucin-1/Muc-1/CD227 /FITC  熒光素標(biāo)記粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體IgG豬脫氫B(LDHB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

靛藍(lán) AR,90%Anti-Muc2/FITC  熒光素標(biāo)記粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體IgG豬D-脫氫(D-LDH)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

靛藍(lán) 98%Anti-mucin-3/Muc-3 /FITC  熒光素標(biāo)記粘蛋白-3抗體IgG豬芳硫酯B(ASB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

麗絲羅丹明B 85%Anti-mucin4/Muc4/FITC  熒光素標(biāo)記粘蛋白-4抗體IgG豬組織多肽抗原(TPA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

麗絲羅丹明B 85%,用于培養(yǎng)Anti-mucin 5B/Muc5B/FITC  熒光素標(biāo)記粘蛋白-5B抗體IgG豬免疫球蛋白A Fc段受體(FcαR/CD89)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

熒光桃紅B AR,Dye content ≥80 %Anti-MUC5AC/Mucin 5AC /FITC  熒光素標(biāo)記胃粘液素抗體IgG豬β4(TMSβ4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

熒光桃紅B 高純級(jí),≥97.0 %Anti-MuRF1/Trim63/FITC  熒光素標(biāo)記肌肉特異性泛素蛋白連接1抗體IgG豬前列腺素E合2(PTGES2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

孟加拉玫瑰紅 BRAnti-MTF-1/FITC  熒光素標(biāo)記金屬反應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子-1抗體IgG豬去素(NA/NE)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

孟加拉玫瑰紅 90%Anti-MyD88 /FITC  熒光素標(biāo)記髓樣分化蛋白抗體IgG豬骨粘連蛋白(ON)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

孟加拉玫瑰紅 95%Anti-Myelin P0 protein/FITC  熒光素標(biāo)記外周髓脂P0蛋白/P0蛋白抗體IgG豬微管蛋白α3C(TUBα3C)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

日落黃 87%Anti-Myf6/FITC  熒光素標(biāo)記生肌調(diào)節(jié)因子6抗體IgG豬半胱氨酰白三烯受體2(CYSLTR2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

日落黃 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥95% (HPLC)Anti-Myt1/FITC  熒光素標(biāo)記髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體IgG豬成纖維生長(zhǎng)因子受體4(FGFR4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

檸檬黃  >95%(HPLC)Anti-Phospho-Myt1 (Ser83) /FITC  熒光素標(biāo)記化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體IgG豬蛋白C(PROC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

焦銅 電鍍級(jí),99%Anti-MyoD1/Myf3/FITC  熒光素標(biāo)記肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體IgG豬I型前膠原羧端原肽(PICP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。

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