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肝脂酶(HL)可見分光光度法檢測(cè)試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-27 10:56:20瀏覽次數(shù):196次

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生化檢測(cè)試劑盒
科研細(xì)胞
貨號(hào) GOY-01S6646
肝脂酶(HL)可見分光光度法檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:脫氧堿;Deoxyaconitine 3175-95-9 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
松柏醛;4-Hydroxy-3-meth 458-36-6 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
三白草;sauchine 177931-17-8 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
D-;D-Pinitol 10284-63-6 規(guī)格

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

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商品屬性:

產(chǎn)品名稱

肝脂酶(HL)可見分光光度法檢測(cè)試劑盒

規(guī)格

50管/24樣

檢測(cè)方法

可見分光光度法

貨號(hào)

GOY-01S6646

商品介紹:

測(cè)定意義

肝酯酶是脂肪分解酶,在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞中合成,存在于肝臟竇周間隙內(nèi)皮細(xì)胞表面和竇周間隙腔面的肝細(xì)胞微絨毛表面,可促進(jìn)脂蛋白中的向類固醇激素轉(zhuǎn)化,血漿中的HL活性增高時(shí),血漿中小顆??蓪?dǎo)致LDL水平升高,加速動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。

測(cè)定原理

肝酯酶水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生α-萘酚,可與固藍(lán)B鹽形成紫紅色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內(nèi)與肝酯酶活性成正相關(guān)。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、冷凍離心機(jī)、研缽、水浴鍋、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血35ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔510分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。

乙酰肝素蛋白多糖2Human SRX1(Sulfiredoxin-1) ELISA Kit2,5-二苯惡唑

肝癌相關(guān)抗原hca25aHuman SS18L2 ELISA Kit壬酸

己糖激3抗體Human FZD1(Frizzled-1) ELISA Kit鎳箔

人乙肝病pre S1/S2蛋白抗體Human SSH3 ELISA Kit木香揮發(fā)油

人乙肝病pre S1蛋白抗體Human SRFBP1 ELISA Kit毛兩面針?biāo)?/span>

己糖激1抗體Human SSR4 ELISA Kit松脂醇二葡萄糖苷

己糖激2抗體Human SRGAP2 ELISA Kit5-羥色鹽酸鹽

熱休克蛋白90α抗體Human SRGAP1 ELISA Kit紅參

肝脂酶(HL)可見分光光度法檢測(cè)試劑盒(S)-(+)-1--1,2-乙二 99%核因子/k因結(jié)合核因子 p52/p100抗體CARD7/NALP1  凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體

(±)芐氧羰-a-膦酰甘氨酯 97%線粒體復(fù)合物NDUFS7蛋白抗體CARD6  凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體

(R)-(-)-2- 98%尼曼匹克C2前體蛋白抗體CARD4  凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體

L-(-)-3- 98%煙酰腺嘌呤二核苷1抗體CARD17/INCA  凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體

D-(+)-3-  98%一氧化氮合成-1抗體(神經(jīng)型)CARD15  凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體

(S)-(+)-1--1,2-乙二對(duì)磺酯 98%轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NKX6.1抗體CARD14  凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體

DL(±)-3-氨-3- 98%造血蛋白1抗體CARD12  凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體

Z-L-氨 98%骨巢蛋白抗體CARD11  凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體

(S)-(-)-1,2,3,4-四氫-3-異喹啉 98%NUP54抗體CARD10  BCL10結(jié)合蛋白和激活核轉(zhuǎn)錄因子抗體

N-對(duì)磺酰甘氨 98%親核素β1抗體CAPZA2/CapZ alpha 2  F肌動(dòng)蛋白α2亞抗體

O-(四氫-2-)羥 98%谷氨受體NMDAζ1抗體CAPZA1  F肌動(dòng)蛋白α1亞抗體

(S)-(-)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧  97%谷氨受體NMDAζ2抗體Capsid protein VP1  大鼠細(xì)小病H-1株(H-1)抗體(N端)

N-Cbz-L-高絲氨內(nèi)酯  98%神經(jīng)元素2抗體capsid protein  豬圓環(huán)病Ⅱ型衣殼蛋白

2-(N-Cbz)-3-(N-Boc)-2,3-二氨 98%抑癌因NDRG3抗體CAPG2/NCAPG2  染色體相關(guān)蛋白2抗體

Cbz-beta-氨-L-氨 98%有絲分裂氧化1抗體CAPD3/hCAP-D3  濃縮素2復(fù)合亞D3抗體

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