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貨號 | GOY-01S6658 |
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選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/48樣 |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
貨號 | GOY-01S6658 |
商品介紹:
測定意義
磷脂酶C(EC 3.1.4.3)是一種水解甘油磷酸酯C3位點(diǎn)甘油磷酸酯鍵的脂類水解酶,廣泛存在于微生物及動植物的組織和細(xì)胞中,在細(xì)胞代謝、細(xì)胞傳遞、生長發(fā)育等方面具有重要作用。
測定原理
磷脂酶C催化水解NPPC產(chǎn)生對硝基,在410nm處有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
Geobacillus thermoleovorans一氧化氮合成檢測試劑盒
Aneurinibacillus migulanus核糖核酸A4檢測試劑盒
Sporolactobacillus inulinusDisabled同源物1檢測試劑盒
Desulfobacterium macestiiβ2糖原蛋白抗體檢測試劑盒
Ureibacillus thermosphaericus低氧誘導(dǎo)因子α檢測試劑盒
Desulfomicrobium escambiense血紅素加氧檢測試劑盒
Brevibacillus thermoruber發(fā)燒伴血小板削減綜合征病檢測試劑盒
Sporosarcina globispora立克次體抗體IgM檢測試劑盒
磷脂酶C(PLC)可見分光光度法檢測試劑盒野分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-CD34 CD34抗體人軟骨寡聚質(zhì)蛋白(COMP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
花旗松素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%Anti-CD34 CD34抗體人胱天蛋白10(P10)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
蔓荊子黃素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%(HPLC)Anti-CD38 CD38抗體人胱天蛋白11(P11)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
二胍 97%Anti-CD38 CD38抗體人胱天蛋白12(P12)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三聚硫 95%Anti-CR1/CD35 Ⅰ型補(bǔ)體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)人胱天蛋白14(P14)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
偏硅鈉,五水 95%Anti-CD36/PAS-4 CD36抗體人胱天蛋白8(P8)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
零水偏硅鈉 SiO2, 44-47% Anti-CD4 CD4抗體人胱天蛋白4(P4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
偏硅鈉,九水 ARAnti-CD7 CD7抗體人胱天蛋白7(P7)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
鈦四丁酯 CP,98.0%Anti-CD8 CD8抗體人胱天蛋白激活的脫氧核糖核(CAD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
鈦四丁酯 ≥99.0% (GC)Anti-CD9/MRP-1 CD9蛋白抗體人胱天蛋白9(P9)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
薯蕷皂素 90%Anti-CD40L CD40L抗體人α1連接素(CTNNα1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
橙皮素 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥98%Anti-Integrin alpha 2b/CD41 血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體人β1連接素(CTNNβ1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
橙皮素 97%Anti-CD43/SPN CD43抗體人組織蛋白D(CTSD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
番茄紅素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥95%Anti-CD44/PGP1 CD44抗體人組織蛋白K(CTSK)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
胡椒堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98% Anti-CD44v4 CD44V4抗體人組織蛋白L(CTSL)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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