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貨號 | GOY-01S6660 |
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操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/24樣 |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
貨號 | GOY-01S6660 |
商品介紹:
測定意義
磷脂酶A2(EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂?;饷?,廣泛存在于動植物組織、細菌、細胞核分泌物中,參與脂肪消化,成熟、細胞信號傳遞、脂質(zhì)過氧化修復(fù)、宿主反應(yīng)等生理過程,在控制體內(nèi)磷脂類物質(zhì)平衡、調(diào)節(jié)機體新陳代謝、參與疾病的病理進程等方面發(fā)揮著及其重要的作用。
測定原理
磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸(HEPC)產(chǎn)生游離巰基,與DTNB反應(yīng)生成黃色物質(zhì),在412nm處有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、超速冷凍離心機、研缽、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿。
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
Anti-SLT/SLT-IIe(O139) /FITC 熒光素標(biāo)記抗豬水腫素(O139)抗體IgG
Anti-Slug/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體IgG
Anti-Smac/DIABLO/FITC 熒光素標(biāo)記線粒體促凋亡蛋白抗體IgG
Anti-phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic/FITC 熒光素標(biāo)記化SMAD抗體IgG
Anti-Smad 1/FITC 熒光素標(biāo)記Smad 1抗體IgG
Anti-Phospho-Smad1 (Ser206) /FITC 熒光素標(biāo)記化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體IgG
Anti-Phospho-Smad1/5 (Ser463/465)/FITC 熒光素標(biāo)記化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5抗體IgG
Anti-Smad2/3 /FITC 熒光素標(biāo)記Smad 2/3抗體IgG
磷脂酶A2(PLA2)可見分光光度法檢測試劑盒二乙酮 98%豬肌U型激,線粒體(CKMT1)免疫試劑盒α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1VAP1 血管粘附蛋白1抗體
五化 99.998% metals basis豬饑餓激素(GHRL)免疫試劑盒凋亡相關(guān)蛋白3抗體VANGL2 神經(jīng)管畸形相關(guān)蛋白VANGL2抗體
鄰二 99%豬活性氧(ROS)免疫試劑盒肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體VANGL1/LPP2 腫瘤抑制因LPP2抗體
2-噻吩 99%豬活化蛋白C(APC)免疫試劑盒ATP結(jié)合蛋白家族7抗體VAMP-3 囊泡相關(guān)膜蛋白3抗體
噻吩-2-乙 98%豬黃體生成素(LH)免疫試劑盒ASCL2蛋白抗體VAMP-2 囊泡相關(guān)膜蛋白2抗體
乙酰氧肟 98%豬環(huán)腺苷(cAMP)免疫試劑盒化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體VAMP-1/Synaptobrevin-1 VAMP1囊泡相關(guān)膜蛋白1抗體
雙(2-乙)鹽鹽 98%豬環(huán)鳥苷(cGMP)免疫試劑盒化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體VAM1/MPP6 棕櫚?;さ鞍?抗體
羧氧半鹽鹽 98%豬化學(xué)趨化因子(KC)免疫試劑盒化活化復(fù)制因子2抗體V5 tag V5 tag標(biāo)簽抗體
水楊羥肟 99%豬紅生成素(EPO)免疫試劑盒化活化復(fù)制因子2抗體V.cholera Ogawa 01群小川型亂弧菌抗體
二二硅烷 CP,掃尾劑豬黑素皮質(zhì)素受體-2(MC2R)免疫試劑盒化活化復(fù)制因子2抗體V.cholera Ogawa 01群稻葉型亂弧菌抗體
二二硅烷 >98.5%(GC)豬核因子-κB(NF-κB)免疫試劑盒化活化復(fù)制因子2抗體UXT/Ubiquitously expressed transcript 廣泛表達轉(zhuǎn)錄蛋白UXT抗體
亞麻乙酯 80%,天然豬核受體亞家族1,H組,成員4(NR1H4)免疫試劑盒化活化復(fù)制因子2抗體UVRAG/DHTX 輻射耐受相關(guān)蛋白DHTX抗體
亞麻乙酯 98%豬含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨激2(Tie-2)免疫試劑盒化活化復(fù)制因子2抗體UTS2R/GPCR GPR14 G蛋白偶聯(lián)受體14抗體
亞麻 ~70% (GC) ,天然豬胱抑素C(CST3/Cys-C)免疫試劑盒活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體UTS2D 尾2相關(guān)肽抗體
鈦四丁酯 ≥99.0% (GC)豬胱硫β合(CBS)免疫試劑盒活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體UTP14A/SDCCAG16 結(jié)腸癌抗原16抗體
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