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貨號 | GOY-01S6661 |
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【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6661 |
商品介紹
測定意義 脂蛋白酯酶是脂肪細胞、心肌細胞、骨骼肌細胞、乳腺細胞及巨噬細胞等實質(zhì)細胞合成的一種酶,可催化甘油三脂水解為脂肪酸和單酸甘油酯,以供組織氧化供能和貯存,并在不同的組織表現(xiàn)出不同的生理意義。 測定原理 脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕櫚酸酯產(chǎn)生4-硝基,在400nm有特征吸收峰。 自備實驗用品及儀器 天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計、微量石英比色皿。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
鹽酸咪唑 分析標準品蘆薈寧 分析標準品,≥99%Anti-E2F6/FITC 熒光素標記抗轉(zhuǎn)錄因子E2F-6抗體IgG
利谷隆 分析標準品脫水羊藿素 分析標準品,≥99%(HPLC)Anti-E2 tag/FITC 熒光素標記E2 tag標簽抗體IgG
十九酸甲酯 分析標準品乙酸龍腦酯 分析標準品Anti-E2 tag/HRP 辣根過氧化物標記E2 tag標簽抗體IgG
麥芽三糖 分析標準品 分析標準品(劇品)Anti-E7 protein/FITC 熒光素標記人瘤病16型E7抗體IgG
莫能菌素 分析標準品補骨脂二氫黃酮甲 分析標準品,≥98%Anti-EAAT1/Glast /FITC 熒光素標記膠質(zhì)谷運載蛋白1 抗體IgG
甲苯噻隆 分析標準品鵝酸 分析標準品Anti-EAAT2/FITC 熒光素標記抗膠質(zhì)谷運載蛋白2抗體IgG
甲氧隆 分析標準品鹽 分析標準品,≥98%Anti-EAAT3/FITC 熒光素標記抗膠質(zhì)谷運載蛋白3抗體IgG
氯化甲基汞 分析標準品脫水內(nèi)酯琥珀酸半酯 分析標準品,≥99%Anti-EAG1/FITC 熒光素標記離子通道蛋白EAG1抗體IgG
脂蛋白酯酶(LPL)微量法檢測試劑盒正癸烷 98%化酮激M2抗體BARD1 癌易感因環(huán)狀結(jié)構(gòu)域蛋白抗體
十二烷 98%化蛋白激R抗體BAP31 BAP31蛋白抗體
十二烷 Standard for GC,≥99.5% (GC)化蛋白激R抗體BAP135/TFII I 蛋白酪氨激BAP135抗體
十四烷 98%化蛋白激R抗體Band3/CD233 紅陰離子交換蛋白1抗體
十四烷 99%化酯Cγ2抗體Bak Bcl-2同源拮抗劑抗體
十四烷 Standard for GC,>99%(GC)化酯Cγ2抗體BAI2/Brain Specific Angiogenesis Inhibitor 2 腦特異性血管生成抑制蛋白2抗體
十四烷 分析標準品, ≥99.5% (GC)酯Cγ1抗體BAI1 腦特異性血管生成抑制蛋白1抗體
十四烷 無烯烴, ≥99.0% (GC)化血小板源性生長因子受體α/β抗體BAGE4 腫瘤/抗原2.4抗體
十三烷 Standard for GC,>99%(GC)化血小板源性生長因子受體-B抗體BAGE3 腫瘤/抗原2.3抗體
十三烷 98%化血小板源性生長因子受體-B抗體BAGE2 腫瘤/抗原2.2抗體
十三烷 99%化血小板源性生長因子受體-B抗體BAG5 BCL2分子伴侶調(diào)節(jié)蛋白5抗體
十三烷 分析標準品,>99.5% (GC)化血小板源性生長因子受體-B抗體BAG3 Bcl2抑凋亡蛋白Bag3抗體
十一烷 98%化血小板源性生長因子受體-B抗體BAG2 Bcl-2結(jié)合抑凋亡蛋白2抗體
B6 99%化蛋白活化受體4抗體Bag1/RAP46 抑凋亡因bag1抗體
Amberlyst® 15離子交換樹脂 濕PDZ連接激/T-LAK源蛋白激抗體BAFFR/CD268 B活化因子受體抗體
測定步驟:
1、 酶標儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
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