當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>脂肪酸代謝系列>> 肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)微量法
貨號 | GOY-01S6669 |
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商品介紹
測定意義 肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶是存在于線粒體內(nèi)膜的一類酰基轉(zhuǎn)移酶??赡娴卮呋瘡孽;鶎Ⅴ;D(zhuǎn)移至L-肉毒堿的反應(yīng),在轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪酸通過線粒體內(nèi)膜的過程中起重要作用。 測定原理: 基于肉堿和脂酰在丙二酰存在與否的條件下,通過肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-I)的作用,產(chǎn)生脂酰肉堿,并釋放出巰基(COA-SH),與Ellman試劑DN-TB反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的TNB。通過其吸收峰值得變化(412nm),來定量分析CPT-1的活性。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6669 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通常可以使測定正常。
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
Bacillus cereus脫氧核糖核酸檢測試劑盒
Bacillus cereus透明質(zhì)酸檢測試劑盒
Bacillus cereus固氮檢測試劑盒
Bacillus cereus條紋花葉病檢測試劑盒
Bacillus cereus線條花葉病檢測試劑盒
Bacillus cereus1.6二果糖酸檢測試劑盒
Bacillus cereus查爾酮異構(gòu)檢測試劑盒
Bacillus mycoides類黃酮-3',5'-羥化檢測試劑盒
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)微量法檢測試劑盒迷迭香 97%Bassoon(BSN) 猴多效生長因子(PTN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
左旋延胡索乙素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%(HPLC)Bax peptide Bax(多肽抗原)猴衰老關(guān)鍵蛋白4(FBLN4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
紅景天苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97.5%(HPLC)Bcl-2(抗原) Bcl-2(多肽抗原)猴蛋白激活受體2(PAR2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
丹酚A 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子(腦衍化神經(jīng)營養(yǎng)因子)(多肽片斷抗原)猴成纖維生長因子受體2(FGFR2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
丁香 98%ACA11 peptide 擬南芥ACA11蛋白多肽抗原猴胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
D(-)-水楊苷 98%AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥)猴抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
D(-)-水楊苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%bFGF 堿性成纖維生長因子(多肽抗原)猴軸蛋白抑制蛋白2(AXIN2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
青藤堿 97%ACE2(Angiotensin converting enzyme 2) 血管緊張素轉(zhuǎn)換2抗原猴通用轉(zhuǎn)錄因子II F肽1(GTF2F1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
丁香 98%BNP 腦鈉素(多肽抗原)猴周期素依賴性激2(CDK2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
番瀉葉苷A 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥96%BrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脫氧尿苷猴普列克底物蛋白同源物樣結(jié)構(gòu)域家族A成員2(PHLDA2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
(-)-鷹爪豆堿 >98.0%(GC)C5 過敏素C5(補(bǔ)體C5)抗原猴泛素分解(DUB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
番瀉苷B 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%(HPLC)CA125 (Ovarian cancer Anti-gen) 卵巢癌抗原(抗原)猴硫乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
辛弗林 98%CK19 角蛋白19抗原猴胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
茄尼 96%CAD(Caspase-Activated Deoxyribonuclease) Caspase 激活的脫氧核糖核(抗原)猴對氧3(PON3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
S-腺苷硫氨對磺鹽 80%Calponin 1 鈣調(diào)節(jié)蛋白-1(抗原)猴相關(guān)血漿蛋白2(PAPPA2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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