實(shí)驗(yàn)操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。

b．立即在無菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    外周血嗜堿性白血病細(xì)胞：KU812 

別稱KU812; KU-812; KU.812; KU 812

年齡（性別）男；38歲

組織來源器官：外周血； 疾病：慢性髓性白血??； 細(xì)胞類型：嗜堿性

生長特性懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)骨髓母細(xì)胞樣

背景描述KU812細(xì)胞是從一位慢性髓性白血病患者暴發(fā)期的外周血建立的細(xì)胞株，KU812細(xì)胞至少有一個(gè)Ph1(費(fèi)城)染色體。KU812細(xì)胞有一些嗜堿性細(xì)胞的標(biāo)記(如Fc受體、堿性顆粒，生成組胺)，而淋巴標(biāo)記陰性。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋20% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例3×10^5個(gè)/mL

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時(shí)間~40-60 hours

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

抗原表達(dá)情況CD3; Homo sapiens alanyl (membrane) aminopeptidase (ANPEP, CD13); Homo sapiens

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時(shí)試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。

大鼠 CD7 基因全長ORF克隆

大鼠 CDH17 基因全長ORF克隆

大鼠 CDH16 基因全長ORF克隆

大鼠 CDH15 基因全長ORF克隆

大鼠 CDH13 基因全長ORF克隆

大鼠 CDH12 基因全長ORF克隆

大鼠 Cdh8 基因全長ORF克隆

大鼠 CDH2 基因全長ORF克隆

大鼠 CDH1 基因全長ORF克隆

大鼠 DSG4 基因全長ORF克隆

外周血嗜堿性白血病細(xì)胞：KU812 1g 卵白蛋白 Ovalbumin 4℃保存

500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.0   Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.0   常溫保存

50T 登革熱病毒Ⅱ型PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

25g 玉米蛋白 Zein 室溫保存

100mL TES Buffer,0.2M,pH8.0  TES Buffer,0.2M,pH8.0  常溫保存

200mL 電泳級丙烯酰胺溶液(干粉型) Acrylamide Solution（19:1Po`wder）,EG 常溫

2 ug pBridge pBridge 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

泛酸測定培養(yǎng)基 Pantothenic Acid Assay Medium 250g

Phospho-PLC gamma 1/PLCG1(Tyr775)  磷酸化磷酯Cγ1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgM  小鼠抗人IgM 規(guī)格: 1mg

ENTHD1/Epsin2B  Epsin2B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

C1ORF111  1號染色體開放閱讀框111抗體 規(guī)格: 0.2mlATXN1/Ataxin-1  脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml