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保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
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產(chǎn)品名稱 | 用途 | 貨號 |
Sphingomonaspolyaromaticivorans | 僅供科研 | GOY-01J7486 |
菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
溴化 ACS鏑標準溶液 1000μg/mlAnti-Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠、猴、?;阴]oA羧化抗體IgG
銻 99.99% metals basis 銪標準溶液 1000μg/ml Anti-AchE/FITC 熒光素標記乙??贵wIgG
油酸 98%鉺標準溶液 1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO<sub>3</sub>Anti-CHRNA2/FITC 熒光素標記煙堿型乙酰受體A2(神經(jīng)型)抗體IgG
碳酸氫 ACS, 99.7-100.5% (dry basis)鉺標準溶液 1000μg/mL,基體:10%HCLAnti- Beta-Actin/Gold 金標記β-肌動蛋白抗體IgG
玫瑰紅酸鈉 AR銪標準溶液 1000µg/mL in 10%HCLAnti-Acinus L/S/FITC 熒光素標記腺泡Acinus L/S抗體IgG
玫瑰紅酸鈉 90%甲標準溶液 1000μg/mlAnti-Acinus(phospho S1180)/FITC 熒光素標記腺泡化Acinus抗體IgG
羅丹明B AR氟離子(F-)標準溶液 1000μg/mlAnti-Ack1/FITC 熒光素標記Ack1抗體IgG
羅丹明B 高純級,≥95.0%(HPLC)氟離子(F-)標準溶液 500mg/L,溶劑:水Anti-Ack1(Phospho-Tyr284) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠化Ack1抗體IgG
Sphingomonaspolyaromaticivorans天然 Nature,≥50% (HPLC)Anti-Phospho-EGFR(Tyr1086) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠化因子受體抗體IgG大鼠酮激M2型同工(M2-PK)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
天然 Nature,≥95% (HPLC)Anti-Phospho-EGFR(Tyr1148) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠化因子受體抗體IgG大鼠Ras GTP激活蛋白(GAP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
α-藏花素 分析標準品,≥98%Anti-Phospho-EGFR(Tyr1173) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠化因子受體抗體IgG大鼠神經(jīng)調節(jié)蛋白2(NRG-2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
硫黃連堿 分析標準品,≥95%Anti-Phospho-EGFR(Tyr845) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠化因子受體抗體IgG大鼠核因子κB受體活化因子配(RANκL)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
輪環(huán)藤堿 分析標準品,≥98%Anti-Phospho-EGFR(Tyr998) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠化因子受體抗體IgG大鼠饑餓素(GHRL)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
蝙蝠葛堿 分析標準品,≥98%Anti-EGF(mouse)/FITC 熒光素標記因子抗體(小鼠)IgG大鼠胰腺再生蛋白1α(REG1α)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
哈巴俄甙 分析標準品,≥98%Anti-HB-EGF/DTSF/FITC 熒光素標記肝素結合性因子抗體IgG大鼠胰腺再生蛋白4(REG4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
異鉤藤堿 分析標準品,≥98%Anti-EGF/FITC 熒光素標記因子抗體(大鼠)IgG大鼠調節(jié)正常T表達和分泌因子(RANTES)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
異綠原B 分析標準品,≥98%Anti-EP3/FITC 熒光素標記前列腺素E受體3抗體IgG大鼠G蛋白信號調節(jié)蛋白4(RGS4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
異蓮心堿 分析標準品,≥98%Anti-E.coli O6 (Escherichia coli O6)/HRP 辣根過氧化物標記抗大腸埃希桿菌O6抗體IgG大鼠松弛/胰島素樣家族肽受體1(RXFP1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
蒙花苷 分析標準品,≥98%Anti-E.coli DH-5 Alpha/FITC 熒光素標記抗DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體IgG大鼠呼吸道合胞病IgA(RSV-IgA) 聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
木蘭脂素 分析標準品,≥98%Anti-E.coli DH-5 Alpha /HRP 辣根過氧化物標記抗DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體IgG大鼠呼吸道合胞病IgD(RSV- IgD) 聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
蓮心堿 分析標準品,≥98%Anti-E.coli O139/HRP 辣根過氧化物標記抗志賀素大腸桿菌O139抗體IgG大鼠呼吸道合胞病IgG(RSV- IgG) 聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
鹽巴馬汀 97% Anti-E.coli O157/HRP 辣根過氧化物標記抗大腸埃希氏菌O157抗體IgG大鼠呼吸道合胞病IgM(RSV- IgM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
鹽巴馬汀 分析標準品Anti-EPEC/E.coli /HRP 辣根過氧化物標記抗腸致病性大腸桿菌抗體IgG大鼠視黃結合蛋白4(RBP4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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