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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對(duì)于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng)，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

乙酸鎘 二水合物 CP2.4-D丁酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=3%LN(Mouse Laminin) ELISA Kit  小鼠層連蛋白/板層素

氯化銅,二水 CP2.5-D丁酯標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=6%,溶劑:正己烷M-CSF(Mouse Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA Kit  小鼠巨噬集落激因子

氯化銅,二水 AR1,1-二氯乙烷標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.96mg/ml,基體:甲MDC/CCL22(Mouse Macrophage-Derived Chemokine) ELISA Kit  小鼠巨噬來源的趨化因子

氯化銅,二水 ACS反式-1,2-二氯乙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.87mg/ml,基體:甲R(shí)ANTES/CCL5(Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA Kit  小鼠正常T表達(dá)和分泌因子

氯化銅,二水 99.99% metals basis二標(biāo)準(zhǔn)溶液 499mg/L,基體:甲叔丁MIP-2(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 2) ELISA Kit  小鼠巨噬炎性蛋白2

氯化銅,二水 99.999% metals basis鄰苯二甲酸二甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 230.0μg/mL,溶劑:甲OT(Mouse oxytocin) ELISA Kit  小鼠催產(chǎn)素

 硝酸銅，三水 AR,99%鄰苯二甲酸二乙酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 238.0μg/mL,溶劑:甲MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Mouse macrophage inflammatory protein 3 Beta) ELISA Kit  小鼠巨噬炎性蛋白3β

硝酸銅，三水  CP，98%鄰苯二甲酸二正丁酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 195.0μg/mL,溶劑:甲NTX(Mouse cross linked N-opeptide of type I collagen) ELISA Kit  小鼠Ⅰ型膠原N末端肽

疏棉狀嗜熱霉三氟磺鈧 98%兔子視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)免疫試劑盒7號(hào)染色體開放閱讀框65抗體RBBP5  視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白5抗體

四氫-2 2-二-4H--4-酮 95%兔子生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)免疫試劑盒轉(zhuǎn)移cyt-19抗體RbAp48  視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白P48抗體

三(4-溴) 98%兔子生長(zhǎng)激素(GH)免疫試劑盒單核趨化蛋白4抗體RB1CC1  RB1的誘導(dǎo)卷曲蛋白R(shí)B1CC1抗體

2-酰噻唑 97%兔子髓質(zhì)素(ADM)免疫試劑盒CD34抗體Rb/P105 RB  成視網(wǎng)膜瘤因抗體

500ml透氣不透液墊片 40mm口徑 配套42mm口徑蓋兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)免疫試劑盒白共同抗原抗體Rat secretory IgA  分泌型免疫球蛋白A抗體

1,3-二 99%兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)免疫試劑盒化環(huán)腺苷反應(yīng)元件調(diào)節(jié)蛋白抗體RASSF8  RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體

3-吡 97%兔子神經(jīng)特異性烯化(NSE)免疫試劑盒間隙連接蛋白37抗體RASSF7  RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體

2-吡 98%兔子神經(jīng)肽P(NP-P)免疫試劑盒2型補(bǔ)體受體抗體RASSF6  RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體

碳鋇 AR,99%兔子神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)免疫試劑盒唾液轉(zhuǎn)移1/α-2,6唾液轉(zhuǎn)移抗體RASSF5  RASSF5抗體

碳鍶 AR,99%兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)免疫試劑盒碳酐9抗體RASSF4  Ras相關(guān)區(qū)域家族蛋白4抗體

2-環(huán)戊酮 97%兔子軟骨寡聚蛋白(COMP)免疫試劑盒色素P450 17抗體RASSF3  Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體

碳鋇 AR,99%兔子狀瘤病18型衣殼蛋白L1抗體(IgG)免疫試劑盒色素P450 7A1抗體/膽固7a羥化RASSF2  Ras相關(guān)結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)2抗體

碳鋇 CP,98%兔子狀瘤病16型衣殼蛋白L1抗體(IgG)免疫試劑盒膽固24羥化抗體RASSF1A  Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體

碳鋇 SP兔子熱休克蛋白27(HSPB1/HSP27)免疫試劑盒腫瘤新因子1抗體RASL/RASL10A  Ras樣蛋白家族10A抗體

碳鋇 99.95% metals basis兔子缺血修飾白蛋白(IMA)免疫試劑盒膽固25α7羥化抗體RASGRF1  Ras特異性核苷釋放因子1

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。