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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對(duì)于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

萘酚綠B BS2-甲 99%Anti-GrB(Granzyme B)(AA 18-29)/FITC  熒光素標(biāo)記顆粒B抗體IgG

對(duì)酚 AR對(duì)甲 AR,99.0%Anti-gremlin/FITC  熒光素標(biāo)記骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體IgG

2-甲酸 98%鄰苯二甲 98%Anti-GRGDS/FITC  熒光素標(biāo)記抗粘附多肽抗體IgG

5-硝基苊 85.0%雙乙酸鈉 99%Anti-GRO Alpha/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗生長調(diào)節(jié)致癌基因α抗體IgG

橙黃G BS甜菊苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98% (HPLC), 固體Anti-GRK1/FITC  熒光素標(biāo)記G蛋白偶合受體激1抗體IgG

橙黃G   AR，≥80.0% (HPLC)3-(異酰氧)基氧基硅烷 97%Anti-GRK2/FITC  熒光素標(biāo)記G蛋白偶合受體激2抗體IgG

橙黃G ≥96%(HPLC)三乙基硅烷 99%Anti-GRO Beta/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗生長調(diào)節(jié)致癌基因β抗體IgG

橙黃Ⅳ Indicator異酸基三乙氧基硅烷 95%Anti-GRM1/FITC  熒光素標(biāo)記代謝型谷受體1抗體IgG

Sphingomonasabaci2,2'-雙(二)聯(lián) 98%Anti-DRADA/ADAR1/FITC  熒光素標(biāo)記雙鏈RNA腺苷脫氨抗體IgG雞胃內(nèi)因子(GIF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

1,2-雙（二膦）乙烷 97%Anti-DRADA/ADAR1/FITC  熒光素標(biāo)記雙鏈RNA腺苷脫氨抗體（N端）IgG雞化外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

1,1'-雙(二異膦)二茂鐵 98%Anti-DTNB/FITC  熒光素標(biāo)記肌Dystrobrevin β蛋白抗體IgG雞重去素(NEB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

4,6-二(二膦)吩 98%Anti-DTNBP1 /FITC  熒光素標(biāo)記精神分裂癥易感因抗體IgG雞β2微球蛋白(BMG/β2-MG)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雙（1,5環(huán)辛二烯）的鎳（0） 96%Anti-dUTPase/FITC  熒光素標(biāo)記抗脫氧尿嘧三核苷水解抗體IgG雞B淋巴瘤因子3(Bcl-3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

二化雙(三環(huán)己膦)鎳(II) 97%Anti-DVL1 /FITC  熒光素標(biāo)記蓬亂蛋白1抗體IgG雞粘蛋白6(MUC6)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雙(環(huán)戊二烯)鎳(II) 98%Anti-DVH/FITC  熒光素標(biāo)記鴨病性肝炎抗體IgG雞新生狀腺素(Neo-T4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雙(六氟乙酮)合鎳(II)，水合 96%Anti-FLAG Tag (NT)/FITC  熒光素標(biāo)記抗標(biāo)簽FLAG Tag標(biāo)簽抗體（N端）IgG雞腸脂肪結(jié)合蛋白(IFABP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雙(三膦)氫化亞銅 90%Anti-K3/FITC  熒光素標(biāo)記抗K3蛋白抗體IgG雞白介素1受體拮抗劑(IL-1ra)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

芐二膦 99%Anti-FLAG Tag (CT)/FITC  熒光素標(biāo)記FLAG Tag標(biāo)簽抗體（C端）IgG雞肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

1, 2-雙（二環(huán)己）-乙烷 98%Anti-FLAG Tag (CT)/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記 FLAG Tag標(biāo)簽抗體（C端）IgG雞上皮中性?；罨?8(ENA-78)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

雙(二環(huán)己膦) 97%Anti-FLAG Tag(CT)/FITC  熒光素標(biāo)記FLAG Tag標(biāo)簽抗體（C端）IgG雞敏感蛋白1(TSP1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

1,3 -雙（二環(huán)己膦）烷 95%Anti-FLAG Tag(CT)/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記FLAG Tag標(biāo)簽抗體（C端）IgG雞L-脫氫(L-LDH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

 1,2-雙[雙(五氟)膦]乙烷 97%Anti-Dynamin 2/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人鳥苷三－發(fā)動(dòng)蛋白2抗體IgG雞5羥乙(5-HIAA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

1,1'-二(二環(huán)己膦)-二茂鐵 97%Anti-Nadrin/FITC  熒光素標(biāo)記Nadrin抗體IgG雞脯氨/精氨豐富端亮氨豐富重復(fù)蛋白(PRELP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶兩級(jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。