當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>土壤系列>> 土壤羥胺還原酶(HR)可見分光光度法
貨號(hào) | GOY-01S6871 |
---|
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號(hào) |
50管/24樣 | 可見分光光度法 | GOY-01S6871 |
商品介紹
測定意義 土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨,土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體,其強(qiáng)弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發(fā)損失,間接影響氮肥的利用效率。 測定原理 硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮?dú)猓陨肀贿€原為Fe2+,Fe2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物,在510nm處有吸收峰,羥胺還原酶作用于羥胺,使配合物形成量減少,510nm處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、震蕩儀、氮吹儀。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
DNA甲基轉(zhuǎn)移-3α(抗原)Anti-FASTKD3 Antibody豚鼠凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)elisa定量檢測試劑盒
周期素 C(抗原)Anti-FBL Antibody大鼠AMPA離子能谷受體1(GRIA1)elisa定量檢測試劑盒
降鈣素基因相關(guān)肽Anti-FBXL13 Antibody大鼠白介素1α(IL-1α)elisa定量檢測試劑盒
Anti-FBL Antibody大鼠骨保護(hù)素(OPG)elisa定量檢測試劑盒
色素P450單氧化(多肽抗原)Anti-FBXO4 Antibody大鼠B瘤因子2(BCL-2)elisa定量檢測試劑盒
脫羧蛋白體36 cxorf36抗原Anti-FBXO43 Antibody大鼠絨毛膜促性腺(CG)elisa定量檢測試劑盒
(DTX1) (Deltex protein 1)抗原Anti-FBXO7 Antibody大鼠粒集落激因子受體(GCSFR)elisa定量檢測試劑盒
DISC1 N端抗原Anti-FBXW11 Antibody大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)elisa定量檢測試劑盒
土壤羥胺還原酶(HR)可見分光光度法檢測試劑盒B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
β內(nèi)啡肽(β-EP)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
犬弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
白γ-1 鏈C 區(qū)(IGHGI)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
山羊白介素1α(IL-1α)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
小鼠牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
大鼠促甲狀腺素(TSH)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
雞B因子(BF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
牛胱天蛋白1(Casp-1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
犬甘油醛-3-脫氫(GAPDH)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
請輸入賬號(hào)
請輸入密碼
請輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。