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土壤β木糖苷酶 (SβXYS)熒光法

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更新時(shí)間:2022-04-27 16:13:22瀏覽次數(shù):120次

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貨號(hào) GOY-01S6886
土壤β木糖苷酶 (SβXYS)熒光法檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:人體Hemoglobin E RFLP基因分析試劑盒 20次
人體HLA-DPB1 RFLP基因分析試劑盒 20次
人體Interleukin-4-receptor alpha RFLP基因分析試劑盒 20次
人體c-Ki-ras RFLP基因分析試劑盒 20次
人體MMP3 RFLP基因分析試劑盒 20次
人體MMP9

28.png

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

土壤β木糖苷酶 (SβXYS)熒光法

規(guī)格

100管/96樣

檢測(cè)方法

熒光法

貨號(hào)

GOY-01S6886

商品介紹:

測(cè)定意義

β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細(xì)菌和真菌等生物體,是催化木聚糖類(lèi)半纖維素降解的關(guān)鍵酶,產(chǎn)物木糖可作為碳源應(yīng)用于微生物發(fā)酵。另外,β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應(yīng)用于造紙工業(yè),比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保,具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。

測(cè)定原理:

4-羥甲基-7-(MUB)在 365 nm波長(zhǎng)處激發(fā), 能在 470 nm處檢測(cè)到熒光, 它與某些物質(zhì)結(jié)合后熒光特性消失, 通過(guò)酶的水解作用MUB釋放出來(lái), 通過(guò)檢測(cè)熒光量來(lái)表征酶活性。

自備儀器和用品:

多功能酶標(biāo)儀、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血35ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔510分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

Standard for GC,>99.8%(GC)三苯基氯 97%人高香草酸(HVA) ELISA Kit  人高香草酸

無(wú)水乙 藥用級(jí),99.5%三氟磺酸酐 98%人煙酰腺嘌呤二核苷酸(NADPH) ELISA Kit  人煙酰腺嘌呤二核苷酸

光譜純, ≥99.8%四丁基溴化磷 98%CNR-1(Human cadherln-related neuronal receptor1) ELISA Kit  人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1

 電子級(jí)2-硫代酸 98%ATM(Human Ataxia angiectasia mutated) ELISA Kit  人擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因

分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.9%(GC)鈉 98%AhR(Human aryl hydrocarbon receptor) ELISA Kit  人芳香烴受體

農(nóng)殘級(jí), ≥99.8%四氯化硅 AR,99.50%SMAF(Human Specifie Macrophage Arming Paetot) ELISA Kit  人特異性巨噬武裝因子

AR,99.7%四氯化硅 99.9999%MF/MPF(Human maturation promoting factor) ELISA Kit  人促有絲分裂因子

CP,99.5%四氯化硅 99.999999%ATF-1(Human activating transcription factor-1) ELISA Kit  人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1

土壤β木糖苷酶 (SβXYS)熒光法犬胰島素樣生長(zhǎng)因子II(IGF2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

G蛋白偶聯(lián)受體152(GPR152/PGR5)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白體9(LMP7/PSMB9)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

兔過(guò)氧化物體增殖物激活受體α(PPARA)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

κB抑制蛋白激(IKK)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

牛干擾素-tau 免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

皮質(zhì)素-3(Cortxin-3)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

游離原卟啉(FEP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。

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