實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞：H4 

別稱H-4

年齡（性別）37歲

組織來源腦組織

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述H4細胞建系于1973年；它衍生于一個患神經(jīng)膠質(zhì)瘤的37歲病人的腦組織。H4細胞的致瘤特性己經(jīng)被屏蔽，細胞接種動物一般不產(chǎn)生腫瘤結(jié)節(jié)。H4細胞具有修復MNNG損傷5型腺病毒的能力。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性No, in immunosuppressed mice. Yes, in semisolid medium.

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

大鼠 PDCD1LG2 基因全長ORF克隆

大鼠 IL22RA1 基因全長ORF克隆

大鼠 SELP 基因全長ORF克隆

大鼠 CD274 / B7-H1 / PD-L1 基因全長ORF克隆

大鼠 TNFRSF14 基因全長ORF克隆

大鼠 PDCD1 基因全長ORF克隆

大鼠 BMP8A 基因全長ORF克隆

大鼠 CRISP2 基因全長ORF克隆

大鼠 CTSS 基因全長ORF克隆

大鼠 SERPINE1 基因全長ORF克隆

腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞：H4 革蘭氏陰性菌（G-）選擇性培養(yǎng)基 Gram Negative Bacteria Selective Medium 250g

5g 蘇丹黑 B Sudan Black B  室溫保存

250mL Sodium Phosphate Buffer（鈉緩沖液）,0.5M,pH9.5  Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH9.5  常溫保存

2 ug pTCK303 pTCK303 低溫運輸，-20℃保存

IMP3/IGF-IIBP3  胰島素樣生因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-CDC42 (Ser71)  磷酸化細胞分化周期CDC42蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mouse anti-Bovine IgG ascites  小鼠抗牛IgG腹水 規(guī)格: 1ml

Prohibitin  抑制素/瘤抑制因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-human IgG/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

DISC1(NT)  DISC1 N端抗體 規(guī)格: 0.2mlADAMTSL2  整合素樣金屬蛋白與凝樣2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

100mL HEPES Buffer,0.5M,pH7.6  HEPES Buffer,0.5M,pH7.6  常溫保存

phospho-NFATc2(Ser326)  磷酸化核因子活化T細胞胞漿蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml