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保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高,營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng),適用于霉菌、酵母菌、放線(xiàn)菌及需氧細(xì)菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線(xiàn)菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 用途 | 貨號(hào) |
成團(tuán)泛菌 | 僅供科研 | GOY-01J7240 |
菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級(jí)種)、原種(二級(jí)種)和栽培種(三級(jí)種)三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱(chēng)種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無(wú)菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對(duì)于霉菌類(lèi)孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類(lèi)的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
合成硅酸鎂吸附劑 250-125um核苷 99.5%,用于培養(yǎng)KIR(Human killer cell immnoglobulin-like receptor) ELISA Kit 人傷球蛋白樣受體
過(guò)氧化脲素 97%次 99%KLR(Human killer cell lectin-like receptor) ELISA Kit 人傷凝集素樣受體
過(guò)酸鈉 CP, ≥97.0% (RT)5--2'-脫氧尿苷 99%APC(Human activated protein C) ELISA Kit 人活化蛋白C
偏酸鈉,四水 AR 98%Human Protein C ELISA Kit 人蛋白C
二氧化硫脲 98%5-甲基尿苷 99%PF-3(Human plaet factor 3) ELISA Kit 人血小板因子3
四乙酰乙二 92-94 % N4-乙酰胞嘧 98%F1+2(Human prothrombin fragment 1+2) ELISA kit 人原片段F1+2
過(guò)氧化鋅 50-60% ZnO22',3'-異叉腺苷 98%MBP/MBL(Human Mannma binding protein/mannan binding lectin) ELISA Kit 人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素
金屬鈰 錠,1-10mm, 保存在油里, 99.9% metals basis 98%MAC(Human membrane attack complex) ELISA Kit 人膜攻擊復(fù)合物
成團(tuán)泛菌乙二四乙二鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.05000mol/L (0.05M錯(cuò)配修復(fù)蛋白2抗體CK5+6 角蛋白5+6抗體
乙二四乙二鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.02000mol/L (0.02M)5胞嘧抗體CK42 角蛋白42
乙二四乙二鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.01000mol/L (0.01M)T淋巴分化蛋白MAL2抗體CK4 角蛋白4抗體
金標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml環(huán)指蛋白61抗體CK3 角蛋白3抗體
金標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml蕈堿型乙酰受體M3抗體CK20 角蛋白20抗體
鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.000mol/L(1N)錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗體CK2 角蛋白2抗體
鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.5000mol/L(0.5N)血管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體CK19/CK17/CK14/CK10/CK42 角蛋白19,17,14,42,10抗體
鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.2000mol/L(0.2N)巨噬清道夫受體抗體CK19 角蛋白19抗體
鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.1000mol/L(0.1N)生肌調(diào)節(jié)因子6抗體CK18 角蛋白18抗體(C端)
鹽溶液 6mol/L(6N)化CpG結(jié)合蛋白抗體CK18 角蛋白18抗體
鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μ/ml單克隆抗體CK17/Cytokeratin 17 角蛋白17抗體
鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μ/ml單克隆抗體CK16 角蛋白16抗體
標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.05000mol/L (0.1N)GTP結(jié)合蛋白MAS1抗體CK15 角蛋白15抗體
鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000mg/L,溶劑:1%硝髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體CK15 角蛋白15抗體
鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml黑色素瘤相關(guān)抗原抗體CK14/17/42/10 角蛋白14抗體
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