微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。

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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱(chēng)種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無(wú)菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對(duì)于霉菌類(lèi)孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類(lèi)的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng)，適用于霉菌、酵母菌、放線(xiàn)菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線(xiàn)菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

人抵抗素Anti-ZNF875 Antibody水通道蛋白4抗體檢測(cè)試劑盒

人骨特異性堿性BAnti-ZNF76 Antibody水通道蛋白5檢測(cè)試劑盒

人骨鈣素/骨谷蛋白Anti-ZNFN1A2 Antibody水通道蛋白6檢測(cè)試劑盒

人可溶性核因子κB受體活化因子配基Anti-ZNF771 Antibody檢測(cè)試劑盒

人1,25二羥基3Anti-ZNF785 Antibody;蛋白激B-raf檢測(cè)試劑盒

人組蛋白H2bAnti-ZP4 Antibody;蛋白檢測(cè)試劑盒

人骨保護(hù)素Anti-ZRANB2 Antibody絲裂原活化蛋白激1檢測(cè)試劑盒

人骨成型蛋白受體ⅡAnti-ZNHIT1 Antibody絲裂原活化蛋白激3檢測(cè)試劑盒

Sphingomonaskoreensis硬脂 40%，熔點(diǎn)54.0-57.0℃大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)免疫試劑盒鳥(niǎo)苷環(huán)化激活蛋白2抗體IGF2BP3/IMP3  胰島素樣生長(zhǎng)因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白3抗體

十三 97%大鼠內(nèi)脂素(visfatin)免疫試劑盒鳥(niǎo)苷環(huán)化激活蛋白3抗體IGF2BP2/IMP2  胰島素樣生長(zhǎng)因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白2抗體

十四 CP,95%大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨蛋白抑制劑(vaspin)免疫試劑盒氨酮合成抗體IGF2BP1/IMP1  胰島素樣生長(zhǎng)因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白1抗體

十四 AR,98.0%大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素(GC)免疫試劑盒高爾體卷曲螺旋蛋白1抗體IGF1R/CD221  胰島素樣生長(zhǎng)因子I受體抗體

十四 Standard for GC, ≥99.5% (GC)大鼠內(nèi)皮脂肪(EL)免疫試劑盒高爾體卷曲螺旋蛋白2抗體IGF1R/CD221  胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體抗體

氘代環(huán)己烷-d14 D,99.5%大鼠內(nèi)皮抑素(ES)免疫試劑盒戊二酰輔A脫氫抗體IGF II/IGF2  胰島素樣生長(zhǎng)因子-II抗體

N'-對(duì)磺酰-L-精氨 98%大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS/NOS3)免疫試劑盒GTP環(huán)反饋調(diào)節(jié)蛋白抗體IGF I  胰島素樣生長(zhǎng)因子1抗體

L-精氨酰 98%大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換2(ECE2)免疫試劑盒絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2抗體IGF I  胰島素樣生長(zhǎng)因子1抗體

N-乙酰-D-半糖，水合 98%大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換1(ECE1)免疫試劑盒廣泛控制氨合成1樣蛋白1抗體IGC  非洲爪蟾IGC抗體

3-乙酰芐 98%大鼠內(nèi)皮素受體A(ETR-A)免疫試劑盒β1-6 N-乙酰氨葡萄糖轉(zhuǎn)移2抗體IFRD1  干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1抗體（神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白PC4）

DL-氨酰-DL-正纈氨 99%大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)免疫試劑盒化G蛋白激活內(nèi)向通道1抗體IFN-β  干擾素β抗體

N-乙酰-L-氨酰 BR大鼠內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白2抗體IFNGR2  干擾素-gamma受體2抗體

N-乙酰-D-脯氨  98%大鼠內(nèi)素(ET)免疫試劑盒間隙連接蛋白10抗體IFNGR1/CD119  干擾素-gamma受體1抗體

L-氨4-硝酰鹽鹽 99%大鼠母親DPP同源物4(Smad 4)免疫試劑盒間隙連結(jié)蛋白46/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體IFN-Beta  干擾素β抗體

(1S,2R)-2-氨-1,2-二乙  99%大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫試劑盒間隙連結(jié)蛋白50/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體IFNAR2/IFNABR  干擾素α受體2抗體