實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    小鼠海綿體平滑肌細胞

2.組織來源：海綿體組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠海綿體平滑肌細胞分離自海綿體組織；海綿體，又稱海綿體肌，是最硬的平滑肌和結締組織。海綿體是一種勃起組織，外面包有堅厚的白膜，內(nèi)部由結締組織和平滑肌組成海綿狀支架，其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質的膠原中，在消化海綿體組織時，膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細胞與基膜的聯(lián)系，破壞海綿體內(nèi)皮細胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細胞。平滑肌，是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

5.方法簡介：

()實驗室分離的小鼠海綿體平滑肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

()實驗室分離的小鼠海綿體平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-M218

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳1-3代左右

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

50T 布魯氏菌核酸熒光PCR檢測試劑盒（探針法）  低溫運輸，-20℃保存

5L SDS-PAGE電泳液（干粉） SDS-PAGE Running Buffer 常溫保存

2 ug pBBR22b pBBR22b 低溫運輸，-20℃保存

15次 絲狀真菌線粒體DNAout Filamentous Fungal   mtDNAOUT 常溫

2 ug pET-His pET-His 低溫運輸，-20℃保存

PALCAM添加劑1  1ml/支*5

5mg 玉米素 Zeatin -20℃保存

50次 柱式昆蟲R

小鼠海綿體平滑肌細胞波爾頓選擇性肉湯 英文名稱：Bolton Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠前列環(huán)素(PGI2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

卵黃瓊脂基礎（MYP） 英文名稱：Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠前白蛋白(PA)免疫試劑盒*直銷

胰酪胨大豆肉湯基礎 英文名稱：Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)免疫試劑盒進口、組裝

改良V-P培養(yǎng)基 英文名稱：V-P Medium,Modified 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠葡萄糖激(GCK)免疫試劑盒進口、分裝

胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎 英文名稱：Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠葡萄糖調節(jié)蛋白78(GRP78)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

酪蛋白瓊脂 英文名稱：Casein Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠葡萄糖6脫氫(G6PD)免疫試劑盒*直銷

紅葡萄糖肉湯 英文名稱：Phenol Red Dextrose Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠破傷風(Tetanus)抗體免疫試劑盒進口、組裝

硝酸鹽肉湯 英文名稱：Nitrate Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠破骨細胞分化因子(ODF)免疫試劑盒進口、分裝

動力-硝酸鹽培養(yǎng)基（A法） 英文名稱：Power - nitrate medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠蘋果酸脫氫(MDH)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

木糖-明膠培養(yǎng)基 英文名稱：Xylose - gelatin medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠核苷酸化(PNP)免疫試劑盒*直銷