實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    小鼠表皮角化上皮細胞

2.組織來源：皮膚組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠表皮角化細胞分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構，由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細胞（KC）是構成表皮的主要細胞成分，在體內(nèi)處于不斷增殖過程中，分裂的角化細胞主要位于其基底層，少數(shù)位于棘細胞層。隨著向表層的推移，細胞的分化程度逐漸增加，并喪失分裂活性。

5.方法簡介：

()實驗室分離的小鼠表皮角化上皮細胞先中性消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實驗室分離的小鼠表皮角化上皮細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-M215

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2代左右

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

動力--尿素培養(yǎng)基基礎(MIU) Motility Indol Urea Medium Base 250g

5g 固藍 RR 鹽 Fast Blue RR Salt -20℃保存

50T 風疹病毒PCR檢測試劑盒   低溫運輸，-20℃保存

200mL Western印跡膜抗體清除劑 Western Blot Antibody Erasol 室溫保存

2 ug pBFPN1 FIV-BFP pBFPN1 FIV-BFP 低溫運輸，-20℃保存

10mL DNA洗脫液  

2 ug pAAV-MCS pAA

小鼠表皮角化上皮細胞馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) 英文名稱：Potato Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠生長分化因子15(GDF15)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：Potato Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠腎損傷分子1(Kim-1)免疫試劑盒*直銷

馬鈴薯葡萄糖水 英文名稱：Potato Dextrose Water 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠腎素前體免疫試劑盒進口、組裝

綜合馬鈴薯培養(yǎng)基 英文名稱：Intergrated Potato Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠腎素(Renin)免疫試劑盒進口、分裝

麥芽汁培養(yǎng)基 英文名稱：Malt Extract Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

YPD液體培養(yǎng)基 英文名稱：YPD Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)免疫試劑盒*直銷

酵母浸出物葡萄糖土瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：Yeast Extract Glucose Oxytetracycline Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠腎上腺素(EPI)免疫試劑盒進口、組裝

馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂 英文名稱：Potato Dextrose Semisolid Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)免疫試劑盒進口、分裝

沙氏葡萄糖瓊脂（USP） 英文名稱：Sabouraud Dextrose Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

酪蛋白葡萄糖瓊脂 英文名稱：Sabouraud Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS/NOS1)免疫試劑盒*直銷