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行業(yè)產(chǎn)品
當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>進(jìn)口elisa試劑盒>>其它elisa試劑盒>> 48T/96T魚熱休克蛋白90(HSP-90)elisa試劑盒
公司采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | 魚熱休克蛋白90(HSP-90)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Fish Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA Kit |
貨號(hào) | GOY-F74817 |
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時(shí);
3. 吸棄,加檢測(cè)溶液A100µL,37°C孵育1小時(shí);
4. 洗板3次;
5. 加檢測(cè)溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
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樣品收集、處理及保存:
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測(cè)吸光值。
魚熱休克蛋白90(HSP-90)elisa試劑盒操作步驟:
1)運(yùn)用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時(shí)參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2)依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來定,能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測(cè)定成果。
9)在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。
硫酸鎳六水GFAP (D1F4Q) XP® Rabbit mAb2-吡啶甲酰肼
酸銨(分子生物學(xué)級(jí))GFAP (D1F4Q) XP® Rabbit mAb2-羥基-5-酮
微晶纖維素(100 um)YAP (1A12) Mouse mAb5-溴-2-羥基酮
糖;α-糖,一水BNIP3L/Nix (D4R4B) Rabbit mAbBOC-L-焦谷氨酸酯
化鈣二水Phospho-DNAJC2/MPP11 (Ser47) Antibody2-溴-5-甲
二Malic Enzyme 2 Antibody2-溴-3,5-二吡啶
硫酸鎂七水(分子生物學(xué)級(jí))PI3 Kinase Class II α (D3Q5B) Rabbit mAb1,二氫異并呋喃
糖化酶;葡萄糖淀粉酶SignalSilence® FLIP siRNA II2,4,5-三氟甲
酰Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)3,二氟甲酸酯
聚二4000SOS1 (D3T7T) Rabbit mAb1-BOC-氨甲基哌啶
無水酸氫二p44/42 MAPK (Erk1/2) Blocking Peptide (#4695 Specific)2-溴-6-氟吡啶
甲酰SignalSilence® p27 Kip1 siRNA II2,6-二氟-
聚二8000Immunofluorescence Blocking Buffer去甲托品鹽酸鹽
化鋰(分子生物學(xué)級(jí))PAX3 Antibody2,二氟
硫酸亞鐵銨六水α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb (HRP Conjuga)溴-羥基甲酸
紅四氮唑SignalSilence® UCHL1 siRNA II氨基
磺甲氧噠CARD9 Antibody代肟基酸酯
磺甲氧噠(標(biāo)準(zhǔn)品)CK1δ AntibodyL-(+)-環(huán)己基甘氨酸
白介素-22受體抗體4α,8β-Dihydroxyeudesm-7(11)-en-12,8α-olide中文名:別名:分子式:C15H22O4
白介素26抗體Chlorantholide D中文名:別名:8-Hydroxy-2-oxoeudesma-3,7(11)-dien-12,8-olide分子式:C15H18O4
白細(xì)胞介素-20抗體Chlorantholide A中文名:別名:2-Oxoeudesma-3,7(11),8-trien-12,8-olide分子式:C15H16O3
抑制素βC抗體4,5-Dihydroblumel A中文名:別名:分子式:C13H22O3
抑制素βB/Inhibin β B抗體Macrocarpal J中文名:大果桉醛J別名:分子式:C28H42O7
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