當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>elisa檢測試劑盒>>其他elisa檢測試劑盒>> 48T/96T核黃素轉(zhuǎn)運因子2(RFT2)elisa試劑盒
產(chǎn)品名稱:核黃素轉(zhuǎn)運因子2(RFT2)elisa試劑盒
英文名稱:Human riboflavin transporter 2,RFT2 ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
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具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
十二烷(Standard for GC,≥99.5% (GC))GABARAPL1 (D5R9Y) XP® Rabbit mAb溴酮酸
1,2-二烷(Standard for GC,≥99.5%(GC))GABARAPL1 (D5R9Y) XP® Rabbit mAb二三
鄰二甲酸二酯(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-Chk2 (Ser33/35) Antibody己二酰
二異(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-Chk2 (Ser33/35) Antibody油酸酯
間二(Standard for GC,>99.5%)Phospho-Chk2 (Ser19) Antibody2-氟-6-甲酸
鄰二甲酸二正辛酯(standard for GC,≥99.0%(GC))Phospho-Chk2 (Ser19) Antibody1-溴辛烷
4,4'-二氨基二(Standard for GC,≥99.0%(GC))Phospho-Chk2 (Ser516) AntibodyL-谷氨酸二酯鹽酸鹽
鄰二甲酸二壬酯(standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-Chk2 (Ser516) AntibodyL-2-氨基己二酸
1,二烷(standard for GC,≥99.5%(GC))AS160 (C69A7) Rabbit mAb3,3'-二氫氧啉酸
正癸酸(Standard for GC,>99%(GC))SimpleChIP® Human MEF2A Exon 1 Primers月桂基*基溴化銨
己二酸二甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC))HERPUD1 Antibody(R)-2-甲基-CBS-惡唑烷
馬來酸二丁酯(standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-53BP1 (Ser25/29) Antibody(S)-(+)-alpha,alpha-二基脯氨
二甲基亞砜(Standard for GC,≥99.95%(GC))CD4 (RPA-T4) Mouse mAb (violetFluor™ 450 Conjuga)反式-1,2-環(huán)己二
正癸(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-53BP1 (Ser1778) Antibody2-羥基硫酚
二酮(standard for GC, ≥99.5% (GC))Phospho-p53 (Thr81) Antibody羥基-2-甲基吡啶
鄰二甲酸二甲酯(Standard for GC,≥99.7%(GC))Phospho-p53 (Thr81) Antibody癸酰
鄰二甲酸二丁酯(Standard for GC,>99.5%(GC))β-Canin (L54E2) Mouse mAb (IF Preferred)月桂酰
琥珀酸二酯(standard for GC,≥99.6%(GC))IKKβ (L570) Antibody-2-甲氧基吡啶
核黃素轉(zhuǎn)運因子2(RFT2)elisa試劑盒5-甲基糠 98%煙酰胺核苷酸轉(zhuǎn)氫酶抗體DL-2-氨基丁酸 99%毛細(xì)線蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒3-巰基-2-丁 98%利鈉肽受體B抗體D-2-氨基丁酸 99%山羊皰疹病通用探針法熒光定量PCR試劑盒2-巰基-3-丁,異構(gòu)體混合物 ≥97%, FG利鈉肽受體C抗體二乙二乙 99.0%頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒3-甲硫基 99%磷酸化谷氨酸受體2B抗體二乙二乙 Standard for GC, ≥99.5% (GC)節(jié)狀古柏線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒3-巰基-2-戊 95%磷酸化谷氨酸受體2B抗體二乙二乙 CP,98%白喉棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒甲基(2-甲基-3-基)二硫 ≥98%, FGNADPH氧化酶2抗體二乙二單乙醋酸酯 99%倍贊氏金蠅探針法熒光定量PCR試劑盒2-甲基四氫噻吩-3- 97%NADPH氧化酶活化蛋白1抗體乙酸異辛酯 99%肉梭狀芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒3-甲硫基己乙酸酯 97%磷酸化細(xì)胞核因子抗體乙二乙乙酸酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)溶血梭狀芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
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