實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    脂肪間充質干細胞

2.組織來源：脂肪組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

人脂肪間充質干細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織中也存在一些干細胞群，具有自我更新能力和多向分化潛能，被稱為脂肪組織來源的間充質干細胞，簡稱脂肪間充質干細胞。與骨髓間充質干細胞相比，在來源、細胞群特點以及分化潛能等多方面極為相似。但是，脂肪間充質干細胞更易獲得足夠數(shù)量的細胞，且獲取過程中對機體損傷更小，是更為理想的自體干細胞源。脂肪組織分離得到脂肪間充質干細胞以梭形為主要形態(tài)，BrdU可標記其細胞核。

5.方法簡介：

()實驗室分離的人脂肪間充質干細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

()實驗室分離的人脂肪間充質干細胞經(jīng)CD29、CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-H202

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

5g 二硫蘇糖醇 (DTT) Dithiothreitol（DTT） 常溫保存

50T 大腸埃希菌(大腸O157)stx1(282bp)和stx2(584bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存

30次 一站式蛋白質非變性PAGE套裝（中pH 緩沖液套） One-Stop Protein Native PAGE Pack 常溫保存（上樣液需要-20℃保存）

50T 玉米CBH-351 PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存

15次 動物線粒體純化試劑盒 Animal  Mitochondr?嵌?L?

脂肪間充質干細胞平板計數(shù)肉湯（PCB） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬促卵泡素(FSH)免疫試劑盒進口、分裝

普通瓊脂 英文名稱：Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬促甲狀腺素釋放激素(TRH)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

SPYE肉湯 英文名稱：SPYE Broth 產(chǎn)品規(guī)格：100g 豬促甲狀腺素(TSH)免疫試劑盒*直銷

Culture培養(yǎng)基 英文名稱：Culture Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬雌激素(E)免疫試劑盒進口、組裝

瓊脂LT100 英文名稱：Agar LT100 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬雌二醇受體(ER)免疫試劑盒進口、分裝

TGY瓊脂 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬雌二醇(E2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

胰化大豆堅固綠瓊脂 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬成纖維細胞生長因子19(FGF19)免疫試劑盒*直銷

月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯（LST） 英文名稱：Lauryl Sulfate Tryptose Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)免疫試劑盒進口、組裝

EC肉湯 英文名稱：E.Coli Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬腸三葉因子(ITF)免疫試劑盒進口、分裝

乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基 英文名稱：Lactose Bile Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬補體因子H(CFH)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應