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丙二醛(MDA)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6432 |
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/48樣 |
檢測(cè)方法 | 可見(jiàn)分光光度法 |
貨號(hào) | GOY-01S6432 |
商品介紹:
測(cè)定意義
生物體內(nèi)超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號(hào)傳導(dǎo)的作用,但積累過(guò)多時(shí)會(huì)對(duì)細(xì)胞膜及生物大分子產(chǎn)生破壞作用,導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞和組織代謝異常,從而引起多種疾病。
測(cè)定原理:
超氧陰離子與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-在對(duì)氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,根據(jù)A530值可以計(jì)算樣品中O2-含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、水浴鍋、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
Bacillus subtilis subsp. subtilis組織型激肽釋放檢測(cè)試劑盒
Bacillus sp.胃蛋白原檢測(cè)試劑盒
Bacillus sp.甲狀腺球蛋白IgG抗體檢測(cè)試劑盒
Bacillus sp.游離雌三檢測(cè)試劑盒
Bacillus sp.鸚鵡衣原體IgG檢測(cè)試劑盒
Bacillus sp.結(jié)膜靜脈曲張IgG檢測(cè)試劑盒
Bacillus sp.結(jié)膜靜脈曲張IgM檢測(cè)試劑盒
Bacillus sp.沙門氏IgG抗體檢測(cè)試劑盒
超氧陰離子可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒試劑汞 ACS,99.9995% metals basis犬骨成型蛋白7(BMP7)免疫試劑盒化埃茲蛋白抗體MYOM2 肌間蛋白2抗體
化汞 AR,99.5 %(劇品)犬骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒嗜性粒陽(yáng)離子蛋白抗體MYOM1 肌間蛋白1抗體
化汞 ACS(劇品)犬鉤端螺旋體IgG(Leptospira)免疫試劑盒E1A樣分化抑制因子3抗體Myoglobin 肌紅蛋白抗體
化汞 AR,99.5%(劇品)犬弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)免疫試劑盒骨骼肌烯化抗體MyoGEF 肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體
化汞 CP,99.0%(劇品)犬睪酮(T)免疫試劑盒真核翻譯起始因子2C1抗體MYOG/Myogenin 肌紅蛋白抗體(肌生成素)
硝汞 AR,98.5%(劇品)犬高遷移率族蛋白A2(HMGA-2)免疫試劑盒化eIF4E結(jié)合蛋白抗體MyoD1/Myf3 肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體
硝汞 CP,98.0%(劇品)犬高遷移率族蛋白A1(HMGA-1)免疫試劑盒附睪蛋白抑制蛋白Myocardin 促血管平滑肌分化因子抗體
硝汞 GR,99.0%(劇品)犬高爾體膜蛋白1(GOLM1)免疫試劑盒內(nèi)皮素B受體抗體MYLK3 肌球蛋白輕鏈激3抗體
紅色 AR,99.5%(劇品)犬肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)免疫試劑盒大腸桿菌脂多糖抗體MYLK2 肌球蛋白輕鏈激2抗體
黃色 AR,99.5%(劇品)犬肝堿性(L-ALP)免疫試劑盒GLP1類似蛋白Exendin4抗體MYLIP/Idol 低密度脂蛋白受體的誘導(dǎo)降解蛋白抗體
乙汞 AR,98.0%(劇品)犬甘油-3-脫氫(GAPDH)免疫試劑盒化真核翻譯起始因子4B抗體MYL9 肌球蛋白輕鏈9抗體
AR,99.5%(劇品)犬干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體MYL7 肌球蛋白輕鏈7抗體
CP,99.0%(劇品)犬泛素蛋白(Ub)免疫試劑盒化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體MYL6 肌球蛋白輕鏈6抗體
硝亞汞 CP,98% 犬兒茶酚抑素(CAT)免疫試劑盒化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體MYL3/Myosin light chain 3 肌球蛋白輕鏈3抗體
汞溴紅 24~27%犬多肽YY(PYY)免疫試劑盒化因子受體抗體MYH9 肌球蛋白重鏈9抗體
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
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