當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>淀粉系列>> 結合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)微量法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6687 |
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商品介紹
測定意義 GBSS(EC 2.4.1.21)以束縛態(tài)存在于淀粉體中,催化淀粉鏈的加長反應,主要負責直鏈淀粉的合成。 測定原理 GBSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應,將葡萄糖分子轉移到淀粉引物上,同時生成ADP;進一步通過反應體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,其中NADPH生成量與前一步反應生成的ADP數(shù)量呈正比,通過340nm下測定NADPH的增加量,可以計算GBSS活性。 需自備的的儀器和用品 紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6687 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
大鼠抗受體Anti-POLR1C AntibodyP物質檢測試劑盒
人鐵蛋白Anti-POLR2E AntibodyP物質受體檢測試劑盒
小鼠血小板活化因子Anti-POLR2J AntibodyP選擇素檢測試劑盒
人微量轉鐵蛋白Anti-POLR2J AntibodyRho關聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激1檢測試劑盒
大鼠受體Anti-POLR3B AntibodyRho關聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2檢測試劑盒
小鼠橫紋肌輔肌動蛋白αAnti-POLR3A AntibodyRho關聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激5檢測試劑盒
小鼠肌球蛋白Anti-POLR3A AntibodyRNA結合基序蛋白6檢測試劑盒
大鼠心肌肌鈣蛋白ⅠAnti-POLR3D AntibodyRNA聚合轉錄終止因子Ⅰ檢測試劑盒
結合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)微量法檢測試劑盒2,3-二-5,6-二對醌 98%蛋白酪氨-1B抗體BBS5 巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS5抗體
異丁酰乙酯 98%Cyclin A1相互作用蛋白抗體BBC3/PUMA p53正向凋亡調(diào)控因子抗體
酰乙酯 98%野生型P53誘導因1單克隆抗體BAZ/ACF1 溴區(qū)結構域相鄰鋅指蛋白1A抗體
輔Q10 98%多囊腎蛋白1抗體Bax Bax抗體
輔Q10 分析標準品,≥98%多囊腎蛋白2抗體Bax Bax
茄尼 分析標準品,≥96%凋亡相關蛋白4抗體Batroxobin(5H4) 巴曲霉素單克隆抗體
茄尼 95%脂酰肌激催化亞單位D抗體Batroxobin Protein 蛇巴曲抗體
茄尼 96%血小板源性生長因子受體β樣蛋白抗體Batroxobin 蛇蛋白巴曲抗體
98%化酯Cβ3抗體Batroxobin 蛇巴曲抗體
D-α-酚醋酯 96%化蛋白激樣內(nèi)質網(wǎng)激抗體Batroxobin 蛇巴曲抗體
β-蒎烯 98%6果糖激2抗體BAT5 白抗原B相關轉錄蛋白5抗體
β-蒎烯 分析標準品,≥99%化6果糖激2抗體BAT3/BAG6 Bcl2相關抗凋亡因6抗體
α-蒎烯 98%化脂酰肌激抗體BASP1/Nap22 腦富含膜附著信號蛋白1抗體
十二烷 分析標準品,>99.7%(GC)化蛋白激C α/β2抗體BASC4 癌擴增序列蛋白4抗體
正十二烷 >99.0%(GC)蛋白激C α抗體BarX1 BarX1蛋白抗體
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