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豬誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)elisa試劑盒
豬甾體合成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)elisa試劑盒
產(chǎn)品名稱:豬腎上腺素(EPI)elisa試劑盒
英文名稱:Pig Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評價。
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具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費(fèi)。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)英文名稱:PCA-1/Yo Kit,英文縮寫:PCA-1/Yo,產(chǎn)品別名:人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo),人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)英文名稱:anti-IgA-Ab Kit,英文縮寫:anti-IgA-Ab,產(chǎn)品別名:人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab),人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
人抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(CCP)英文名稱:CCP Kit,英文縮寫:CCP,產(chǎn)品別名:人抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(CCP),人抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(CCP)產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)英文名稱:ADAM8 Kit,英文縮寫:ADAM8,產(chǎn)品別名:解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8),解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
狀腺素抗體(TAb)英文名稱:TAb Kit,英文縮寫:TAb,產(chǎn)品別名:狀腺素抗體(TAb),狀腺素抗體(TAb)產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
基質(zhì)裂解素(ST3)英文名稱:ST3 Kit,英文縮寫:ST3,產(chǎn)品別名:基質(zhì)裂解素(ST3),基質(zhì)裂解素(ST3)產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
肌紅蛋白(MYO/MB)英文名稱:MYO/MB Kit,英文縮寫:MYO/MB,產(chǎn)品別名:肌紅蛋白(MYO/MB),肌紅蛋白(MYO/MB)產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
黑色素瘤標(biāo)記物(MART/Melan-A)英文名稱:MART/Melan-A Kit,英文縮寫:MART/Melan-A,產(chǎn)品別名:黑色素瘤標(biāo)記物(MART/Melan-A),黑色素瘤標(biāo)記物(MART/Melan-A)產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
胱天蛋白酶3(Casp-3)英文名稱:Casp-3 Kit,英文縮寫:Casp-3,產(chǎn)品別名:胱天蛋白酶3(Casp-3),胱天蛋白酶3(Casp-3)產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
谷氨酸受體(NMDAR)英文名稱:NMDAR Kit,英文縮寫:NMDAR,產(chǎn)品別名:谷氨酸受體(NMDAR),谷氨酸受體(NMDAR)產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
肝型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)英文名稱:L-FABP Kit,英文縮寫:L-FABP,產(chǎn)品別名:肝型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP),肝型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
激肽釋放酶1(KLK1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
激肽釋放酶1(KLK1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
激肽釋放酶10(KLK10)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
激肽釋放酶10(KLK10)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
激肽釋放酶11(KLK11)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
激肽釋放酶12(KLK12)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
豬腎上腺素(EPI)elisa試劑盒follicle-stimulating hormone促卵泡素種屬: Trichoderma erinaceum猬木霉
gonadotropin-releasing hormone促性腺激素釋放激素種屬: Sepedonium│sp.黃瘤孢屬
prolactin催乳素種屬: Rhodotorula│oryzae米紅酵母
Testoterone睪酮種屬: Annelophora│sp.環(huán)紋梗霉屬
Osteoprotegerin骨保護(hù)素種屬: Sarcodontia│spumea (Sowerby) Spirin松軟氈被孔菌
Bone gla protein;Osteocalcin骨鈣素種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5a/phA3F W126H
bone alkaline phosphatase骨堿性磷酸酶種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5α/pBH10-P(-)
Hormone-sensitive lipase激素敏感性脂肪酶種屬: Stereum│fasciatum扁韌革菌
thyroxine甲狀腺素種屬: Micromonospora│thermoflavobrunnea熱黃褐小單孢菌
phosphoenolpyruvate carboxykinase磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶種屬: Eimeria│mayuriai梅氏艾美耳球蟲
Immunoglobulin A免疫球蛋白A種屬: Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.平菇(熱抗王)
Immunoglobulin G免疫球蛋白G種屬: Sporobolomyces│ruberrimus赤色擲孢酵母
Immunoglobulin M免疫球蛋白M種屬: Scolecobasidium│constrictum E.V. Abbott隘縮齒梗孢
Malate dehydrogenase蘋果酸脫氫酶種屬: Arthrinium│sacchari (Speg.) M.B. Ellis甘蔗節(jié)菱孢
glucose-6-phosphatase葡萄糖-6-磷酸酶種屬: Hymenobacter│sp.薄層桿菌
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