細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    羊膜細(xì)胞：WISH 

別稱Wistar Institute, Susan Hayflick

年齡（性別）女

組織來(lái)源起源HeLa細(xì)胞污染

生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述最初以為，WISH細(xì)胞的起源是正常羊膜，但隨后通過(guò)同工酶分析、HeLA標(biāo)記染色體和DNA指紋法分析，WISH細(xì)胞的起源是HeLa細(xì)胞污染的。WISH細(xì)胞角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。注意：WISH細(xì)胞包含HeLa標(biāo)記染色體，是從HeLa污染細(xì)胞中建株的。

生物安全等級(jí)2

生長(zhǎng)培養(yǎng)基MEM＋1mM Sodium Pyruvate＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:2-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

抗原表達(dá)情況The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.

基因表達(dá)情況The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. The cells and tumors formed from the cells are positive for Dopa decarboxylase and are negative for the TAG-72 antigen.

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問(wèn)題，請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無(wú)菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

實(shí)驗(yàn)操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。

b．立即在無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。

c．用無(wú)菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無(wú)菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無(wú)菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無(wú)菌的含有無(wú)菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時(shí)試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

人 IL2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

人 IL26 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

人 IL4 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

人 IL23A 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

人 IL9 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

人 NRXN3 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

人 CNTF 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

人 PTCH1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

人 WASF1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體

羊膜細(xì)胞：WISH SRG11/Spata17  睪凋亡基因抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-CPLA2(Ser505)  磷酸化胞漿型磷脂A2抗體 規(guī)格: 0.1mlTYRO3/MER+SKY  受體激抗體 規(guī)格: 0.2ml

DC-SIGN/CD209  細(xì)胞間粘附分子非整合素蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

UBR2  泛素蛋白連接E3α2抗體 規(guī)格: 0.2ml

MARCKS  蛋白激C底物Marcks抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-EGFR (Thr678)  磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG/APC  APC標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1ml

JWA  JWA蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗猴IgG 規(guī)格: 0.1ml

50T 馬特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒   低溫運(yùn)輸，-20℃保存

5nmol 接頭DNA（Sal I-Sma I） Adaptors -20℃保存

2 ug pET-3d pET-3d 低溫運(yùn)輸，-20℃保存