微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。

我司專業(yè)代理ATCC菌種，竭誠為大中型科研提供嚴格質(zhì)量體系控制ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標準菌株。批量訂購可享受*，我司可提供完整的售前、售中和售后服務。

菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體Human LIN28B ELISA Kit大鼠熱休克蛋白20（HSP-20）ELISA試劑盒,

自噬相關蛋白4D抗體Human LHPP ELISA Kit大鼠胰島素（INS）ELISA試劑盒,

自噬相關蛋白9A抗體Human LIN7C ELISA Kit豬層連蛋白/板層素（LN）ELISA試劑盒,

縮C抗體Human LILRA5 ELISA Kit豬Ⅱ型膠原（Col Ⅱ） ELISA試劑盒,

谷草轉(zhuǎn)氨抗體Human LIN7B(Protein lin-7 homolog B) ELISA Kit豬熱休克蛋白90（HSP-90）ELISA試劑盒,

三腺苷結合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員5抗體Human LILRA4 ELISA Kit兔熱休克蛋白20（HSP-20）ELISA試劑盒,

三腺苷結合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員8抗體Human LIMD2 ELISA Kit兔子堿性成纖維生長因子（bFGF）ELISA試劑盒,

?；oA脫氫長鏈抗體Human LILRB5 ELISA Kit抗載脂蛋白抗體A1（Apo A1）ELISA試劑盒--動物，人

Arthrobactertecti貝母辛 分析標準品，≥98%人L選擇素(L-Selectin/CD62L)免疫試劑盒蓬亂蛋白2抗體Orexin-A  增食欲素A/欲激素A

小白菊內(nèi)酯 分析標準品，≥98%人L-素免疫試劑盒防御素α5抗體ORAV1  口腔癌高表達的蛋白1抗體

重樓皂甙A 分析標準品，≥98%人L-脫氫(L-LDH)免疫試劑盒鋅離子結合蛋白DTX2抗體Orai2  跨膜蛋白Orai2抗體

重樓皂甙B 分析標準品，≥98%人L-氨氧化(LAO)免疫試劑盒EYA3蛋白抗體OPN/BSP  骨橋蛋白抗體(分泌型蛋白1)人

重樓皂甙C 分析標準品，≥98%人Klotho 免疫試劑盒痛感蛋白抗體OPN/BSP  骨橋蛋白抗體(分泌型蛋白1)

重樓皂甙E 分析標準品，≥98%人KI-67抗原(Ki-67)免疫試劑盒翻譯延伸因子EF-1 α2抗體OPGL/RANKL/ODF  骨保護蛋白配體抗體(破骨分化因子)

重樓皂甙F 分析標準品，≥98%人Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成抗體(Jo1/HRS)免疫試劑盒延伸因子EF-1δ抗體OPG  骨保護蛋白/護骨素抗體

D-松 分析標準品，95%人IV形膠原蛋白α3鏈(COL4A3)免疫試劑盒延伸因子EF-1 γ抗體OPCML  阿片樣物質(zhì)結合蛋白/粘附分子樣蛋白抗體

萊苞迪甙A 分析標準品，≥98%人Igγ3鏈C區(qū)(IGHG3)免疫試劑盒化真核翻譯延長因子2抗體Oncostatin M  癌因蛋白抑瘤素M抗體

絡塞維 分析標準品，≥98%人ICOS配體(ICOSLG)免疫試劑盒化真核延伸因子激2抗體ompF(putative outer membrane porin F protein)  小腸結腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗體

竹節(jié)香附素A 分析標準品，≥98%人ICE蛋白激活因子(IRAP)免疫試劑盒纖連蛋白4抗體OMPC  大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體

遠志皂苷元 分析標準品，≥99%人I 型膠原蛋白(COL I)免疫試劑盒延伸因子結合蛋白EFTUD2抗體Omgp  少突髓脂糖蛋白抗體

番瀉葉苷A 分析標準品，≥96%人H-鈣粘著蛋白/H-鈣粘連蛋白(H-Cad/CDH13)免疫試劑盒因子樣蛋白6抗體OLIG2  少突膠質(zhì)轉(zhuǎn)錄因子2抗體

甜菊苷 80%人HSP60 IgM抗體免疫試劑盒/二酯家族成員6抗體OLIG1  少突膠質(zhì)轉(zhuǎn)錄因子1

甜菊苷 分析標準品，≥98% (HPLC), 固體人HSP60 IgG抗體免疫試劑盒核苷轉(zhuǎn)運蛋白ENT1抗體OLFM4  凋亡蛋白OLFM44抗體