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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>進(jìn)口elisa試劑盒>>豬elisa試劑盒>> 48T/96T豬髓磷脂堿性蛋白(MBP)elisa試劑盒
豬誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)elisa試劑盒
豬甾體合成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)elisa試劑盒
產(chǎn)品名稱:豬髓磷脂堿性蛋白(MBP)elisa試劑盒
英文名稱:Porcine MBP ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時(shí));-20℃(長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí))。
有效期: 6 個(gè)月(4℃);12 個(gè)月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡(jiǎn)便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評(píng)價(jià)。
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具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項(xiàng):
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件;
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時(shí),拍板時(shí)要垂直,避免交叉污染,用力不能過(guò)猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
冠蛋白6(CORO6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforCoronin6(CORO6)
Kruppel樣因子15(KLF15)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforKruppelLikeFactor15(KLF15)
線粒體肌酸激酶1A(CKMT1A)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforCreatineKinase,Mitochondrial1A(CKMT1A)
白介素1β(IL1β)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforInterleukin1Beta(IL1b)
牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforCementumProtein1(CEMP1)
味覺(jué)受體1型成員2(TAS1R2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforTasteReceptorType1Member2(TAS1R2)
神經(jīng)源素1(NEUROG1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforNeurogenin1(NEUROG1)
補(bǔ)體因子H(CFH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforComplementFactorH(CFH)
多巴胺(DA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforDopamine(DA)
氨酸氨肽酶(AAP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforAlanineAminopeptidase(AAP)
凝血因子ⅩⅢA1肽(F13A1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
凝血因子ⅩⅢA1肽(F13A1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
凝血因子ⅩⅢB肽(F13B)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
凝血因子ⅩⅢB肽(F13B)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
凝血因子Ⅺ(F11)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
凝血因子Ⅺ(F11)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
豬髓磷脂堿性蛋白(MBP)elisa試劑盒macrophage inflammatory protein 1α巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1α種屬: Escherichia coli DH5α(pMA5)DH5α(含pMA5質(zhì)粒)大腸桿菌
tartrate-resistant acid phosphatase抗酒石酸酸性磷酸酶種屬: Nisaea│denitrificans脫氮麗希亞女神菌
tartrate-resistant acid phosphatase 5b抗酒石酸酸性磷酸酶5b種屬: Alternaria│alternate互生鏈格孢
Anti-Mullerian hormone Receptor抗繆勒管激素受體種屬: Russula│mustelina Fr.赭蓋紅菇
Anti-Thrombin Ⅲ抗凝血酶Ⅲ種屬: Colletotrichum│hibisci木槿刺盤孢(紅麻炭疽病菌)
Soluble Cluster of differentiation 40 ligand可溶性CD40配體種屬: Curvularia│oryzae稻彎孢
soluble E-selectin可溶性E選擇素種屬: Salmonella│paratyphi B乙型副傷寒沙門菌
sP-selectin可溶性P選擇素種屬: Phycicoccus│bigeumensis飛禽島海藻球菌
Soluble Intercellular Adhesion Molecule 1可溶性細(xì)胞間粘附分子1種屬: Streptomyces│pentaticus五霉素輪絲鏈霉菌
soluble Thrombomodulin可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白種屬: Jeotgalicoccus│marinus海洋咸海鮮球菌
Cotinine可替寧種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5α/pET28a/kasB
mammalian target of rapamyein雷帕霉素靶蛋白種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5a/pET30a/PasecA N75+
Granulocyte Colony Stimulating Factor粒細(xì)胞集落刺激因子種屬: Lactobacillus│kimchii韓泡菜乳桿菌
Crestine phosphokinase磷酸肌酸激酶種屬: Leeuwenhoekiella│palythoae按鈕息肉萊文虎克菌
keratan sulfate硫酸角質(zhì)素種屬: Pestalotiopsis│cocculiPestalotiopsis cocculi
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