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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 單寧酶(TAN)微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6458 |
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選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/48樣 |
檢測(cè)方法 | 微量法 |
貨號(hào) | GOY-01S6458 |
商品介紹:
測(cè)定意義
單寧酶全稱是單寧酯酰水解酶(Tannase,EC 3.1.1.20),它可以水解沒食子酸單寧中的酯鍵和縮酚羧鍵,生成沒食子酸和葡萄糖。
測(cè)定原理:
使用抗氧化劑沒食子酸丙酯(PG)作為單寧酶酶促反應(yīng)的底物,在270nn下測(cè)定底物PG反應(yīng)前后的光密度變化,計(jì)算單寧酶酶活力。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
氧化釔 99.999% metals basis焦 ≥95% H4P2O7 basisPABA(Human para-aminobenzoic acid) ELISA Kit 人對(duì)苯甲酸
氧化釔 99.99% metals basis ,50nm基三苯基溴化膦 99%LPA(Human L-phenylalanine) ELISA Kit 人苯
氧化釔 99.9% metals basis苯基二氯膦 98%Irna(Human Immune RNA) ELISA Kit 人核糖核酸
氧化鐿 99.9% metals basis基三苯基溴化膦 99%Beta-Nph(Human Beta-naphthol) ELISA Kit 人β萘酚
氧化鐿 99.99% metals basis四苯基溴化膦 98%BLI(Human Beta-Lactamase inhibitors) ELISA Kit 人β內(nèi)酰抑制劑
乙(95%) AR,95.0%三丁基膦 95%Gal(Human Alpha-galactoyl) ELISA Kit 人α半乳糖基抗體
乙(95%) for HPLC三氟磺酸 98%AlphaNAG (Human AlphaN-acetylglucosaminidase) ELISA Kit 人αN已酰葡糖苷
95%藥用酒精 藥用級(jí)三苯基氧膦 98%Alpha2-PI (Human Alpha2-plasmin inhititor) ELISA Kit 人α2纖溶抑制物
單寧酶(TAN)微量法檢測(cè)試劑盒3A分子篩 80-100目,氣相、液相色譜柱VD(Human Vitamin D) ELISA Kit 人兔補(bǔ)體成分4b(C4b)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
分子篩3A 干燥劑用VK1(Human Vitamin K1) ELISA Kit 人K1兔色素P450家族成員21B(CYP21B)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
分子篩, 3 ? pellets, 3-5 mmVB12(Human Vitamin B12) ELISA Kit 人B12兔轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TNPO1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
分子篩, 3 ? pellets, 2-3 mmVD3(Human Vitamin D3) ELISA kit 人3兔半凝集素9(GAL9)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
4A分子篩 20-40目,氣相、液相色譜柱VD2(Human Vitamin D2) ELISA Kit 人2兔骨成型蛋白10(BMP-10)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
4A分子篩 40-60目,氣相、液相色譜柱VE(Human Vitamin E) EELISA Kit 人E兔單氧化(MAO)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
4A分子篩 60-80目,氣相、液相色譜柱VA(Human Vitamin A) ELISA Kit 人A兔淋巴功能相關(guān)抗原2(LFA-2/CD2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
4A分子篩 80-100目,氣相、液相色譜柱GEF(Human Guanine Exchange Factor) ELISA Kit 人鳥苷交換因子兔γ干擾素誘導(dǎo)單核因子(MIγ/CXCL9)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
分子篩4A 2mm-3mm,干燥劑用VD R(Human Vitamin D Receptor) ELISA Kit 人受體兔α2纖溶抑制因子(α2-PI)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
分子篩, 4 ? beads, 4-8 mesh TSST-1(Human toxic shock syndrome toxin) ELISA Kit 人性休克綜合征素1兔纖γ(FGγ)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
分子篩, 4 ? beads, 8-12 meshSE(Human staphylococcus aureus enterotoxins) ELISA Kit 人金葡菌腸素兔粘蛋白20(MUC20)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
分子篩, 5 ? 20-40目,氣相、液相色譜柱CNX(Human calnexin) ELISA Kit 人鈣聯(lián)蛋白兔胰淀素(IAPP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
分子篩, 5 ? 40-60目,氣相、液相色譜柱MIS/AMH(Human Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone) ELISA Kit 人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素兔脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
分子篩, 5 ? 60-80目,氣相、液相色譜柱BTC(Human beta cellulin) ELISA Kit 人β素兔轉(zhuǎn)錄激活因子7(ATF7)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
分子篩, 5 ? 80-100目,氣相、液相色譜柱FETU-A(Human Fetuin A) ELISA Kit 人胎球蛋白A兔脂肪結(jié)合蛋白1(FABP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
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