无壳曲霉 返回列表页

保存方法：

传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。

液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

悬液保存法：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

常用的冷冻保存法：

① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围*的微生物保存法。

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菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备　

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备　

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备　

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

硬脂酸异辛酯   95%四(THF) 无水级,≥99.9%, 无稳定剂ALB(Human microalbunminuria) ELISA Kit  人尿微量白蛋白

硬酯酸乙酯 99%四 AR,99.0%AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit  人抗皮质抗体

硬酯酸乙酯 CP，≥65%（GC)四  ≥99.5% (GC)RANA(Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen) ELISA Kit  人抗类风湿关节炎核抗原

硬酯酸乙酯 97%四 for HPLC, ≥99.9%THP(Human T-H glycoprotein) ELISA Kit  人TH糖蛋白

三油酸甘油酯 CP,60.0%四 ACS，>99.5% (GC) GTE-AGE(Human Glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products) ELISA Kit  人肾小球组织糖基化终末产物

甘油单油酸酯  ≥50.0% (HPLC)溴乙烷 AR,98%UP(Human Proteinuria) ELISA Kit  人尿蛋白

甘油单油酸酯  99%N,O-双(基硅烷基)三氟 96%LMP7/PSMB99Human low molecular-weight protein/proteasome beta-type subunit) ELISA Kit  人低分子质量蛋白7/β型蛋白体9

硬脂酸甲酯 99%2-溴噻吩 98%Alpha2-MG(Human Alpha2 macroglobulin) ELISA Kit  人α2巨球蛋白

无壳曲霉邻二 CP大鼠固调节元件结合蛋白1C(SREBP-1C)免疫试剂盒缺氧诱导因1蛋白抗体HIF 2α  缺氧诱导因子2α 抗体HIF-2α

邻二 98.0%大鼠固调节元件结合蛋白1A(SREBP-1A)免疫试剂盒α 亚单抗HIDE1/C19orfC38  19号染色体开放阅读框38抗体

邻二 分析标准品大鼠骨织素(Ostn)免疫试剂盒人乙型肝炎表面抗原单克隆抗体（检测）HIAT1  海马丰富因转录蛋白1抗体

N-乙酰神经氨 98%大鼠骨粘连蛋白(ON)免疫试剂盒人乙型肝炎e抗原单克隆（包被）抗体HHV8/ORF50  人类疱疹病8抗体

侧金盏花 99%大鼠骨形态形成蛋白拮抗蛋白免疫试剂盒人乙型肝炎e抗原单克隆（检测）抗体HHV8/ORF50  人类疱疹病8抗体

1,6-脱水-β-D-葡萄糖 99%大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)免疫试剂盒小鼠抗人血红蛋白单克隆抗体HHV8/ORF50  人类疱疹病8抗体

5-氨戊 97%大鼠骨特异性碱性B(ALP-B)免疫试剂盒型流感病血凝素抗体HHV8/ORF K2  人类疱疹病8抗体/疱疹病8型

2,2′-联氨-双（3-乙并噻唑啉-6-磺）二盐 98%大鼠骨特性碱性C端肽免疫试剂盒化HER2受体抗体HHV8/ORF K2  人类疱疹病8抗体

D-(-)-阿拉伯糖 98%大鼠骨桥素(OPN)免疫试剂盒组蛋白去乙酰化4抗体HHV8/ORF K14  人类疱疹病8 ORF14抗体

D-氨葡萄糖四醋盐 98%大鼠骨碱性(BALP)免疫试剂盒化HER2受体抗体HHV4/CMV  人类巨病抗体

N-乙酰-D-半糖，水合 98%大鼠骨钙素(OT)免疫试剂盒化组蛋白去乙酰化8抗体HHLA2  HHLA2蛋白抗体

D-阿洛糖 98%大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)免疫试剂盒HLA-DR抗体HHEX/HMPH  同源盒蛋白PRH抗体

L-阿洛糖 98%大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)免疫试剂盒人类白抗原G抗体hHBrk1  微丝相关蛋白hHBrk1抗体

D-阿卓糖  99%大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)免疫试剂盒高迁移率族蛋白A2抗体hHb(H5A3)  人血红蛋白单克隆抗体

2-乙酰氨-3,4,6-三-O-乙酰-2-脱氧-α-D-葡萄糖酰 95%大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫试剂盒高迁移率族蛋白B1抗体HGFA/HGF activator  肝生长因子激活蛋白抗体