進口原裝elisa試劑盒用途： 用于人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中潛伏膜蛋白1(LMP-1)的測定。
人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA檢測試劑盒檢測原理
本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定樣品中人潛伏膜蛋白1(LMP-1)的水平。向預(yù)先包被了人潛伏膜蛋白1(LMP-1)單克隆抗體的酶標孔中加入潛伏膜蛋白1(LMP-1)，溫育；溫育后，加入生物素標記的潛伏膜蛋白1(LMP-1)抗體，再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合，形成免疫復合物，再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶，然后加入底物A、B，產(chǎn)生藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺與樣品中人潛伏膜蛋白1(LMP-1)的濃度呈正相關(guān)。
注意事項
從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
為避免交叉污染，要避免重復使用手中的吸頭和封板膜。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。
6.   所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按生物廢棄物處理。終止液為2M硫酸，使用時必須注意安全。
7.  各步驟加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校準其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
8.  每次試驗測定的同時做標準曲線，。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔高濃度的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n）。
9.  配制試劑時，要用旋渦混合儀混勻。加入孔內(nèi)的試劑，充分混勻?qū)y試結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器(使用低頻率)，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)前手工輕輕晃動酶標板1分鐘，例如做圓周動作，使加入孔中的反應(yīng)液混勻。
10.  實驗用酶標儀應(yīng)嚴格按使用說明書規(guī)范操作，并在使用前充分預(yù)熱。
11.  手工洗板應(yīng)注意：甩掉酶標板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復此過程數(shù)次。自動洗板：如果有自動洗板機，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
樣本要求
1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存或根據(jù)存放，時間做相應(yīng)溫度調(diào)整，但應(yīng)避免反復凍融，（由于樣本種類過多，每個單位處理方式不一樣，本說明書不做詳細介紹）。
人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA檢測試劑盒操作程序
標準品的稀釋：（本試劑系統(tǒng)提供原倍標準品一支，用戶請按照說明自行在小試管中倍比稀釋）按下表格執(zhí)行：
 500ug/ml
（5號標準品）
120μl的原倍標準品加入120μl的標準品稀釋液
 250ug/ml
（4號標準品）
120μl的5號標準品加入120μl的標準品稀釋液
   125ug/ml
（3號標準品）
120μl的4號標準品加入120μl的標準品稀釋液
  62.5ug/ml
（2號標準品）
120μl的3號標準品加入120μl的標準品稀釋液
  31.2ug/ml
（1號標準品）
120μl的2號標準品加入120μl的標準品稀釋液
進口原裝elisa試劑盒根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
加樣：1）空白孔：（空白對照孔不加樣品，生物素標記的抗?jié)摲さ鞍?(LMP-1)抗體，鏈霉親和素-HRP，其余各步操作相同 ；2）標準品孔:加入標準品50μl，鏈霉親和素-HRP50μl（標準品中已事先整合好生物素標記抗體，故在操作時不加，只加鏈霉素-HRP）；3）樣本反應(yīng)孔：加入樣本40μl，然后各加入抗?jié)摲さ鞍?(LMP-1)抗體10μl、鏈霉親和素-HRP（空白孔除外）50μl。蓋上封板膜，輕輕振蕩混勻，37℃溫育60分鐘。
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋備用。
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。
終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進行。
結(jié)果判斷
1. 每個標準品和標本的OD值應(yīng)減去零孔的OD值。（若不減零孔值，標準曲線的零孔應(yīng)相交于Y軸）
2. 根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種熟悉應(yīng)用軟件來計算。
3．手工繪制標準曲線。以標準品濃度作橫坐標，OD值作縱坐標，以平滑線連接各標準品的坐標點。通過標本的OD值可在標準曲線上查出其濃度。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進行分析計算結(jié)果。
4．若標本OD值高于標準曲線上限，應(yīng)適當稀釋后重測，計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。
操作總結(jié)
準備試劑，樣品和標準品
加入準備好的樣品和標準品，生物素標記二抗和酶標試劑，37℃反應(yīng)60分鐘。
洗板5次，加入顯色液A、B,37℃顯色10分鐘
 加入TMB終止液
10分鐘內(nèi)酶標儀測OD值
 計算待測樣本因子含量
人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA檢測試劑盒試劑盒性能
準確性：標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9200。
靈敏度：小可檢測濃度達，1.95ug/ml。
特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5 . 回收率：70-110%.
6. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
7. 有效期：6個月
8. 進口原裝elisa試劑盒檢測范圍： 950ug/ml -7.8ug/ml