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elisa定量檢測試劑盒重復性差緣由及解決方法

時間:2017/11/9閱讀:263
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elisa定量檢測試劑盒重復性差緣由及解決方法:
1、樣品數(shù)量不一,加樣時間長短不一。解決方法:重復某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近。2、樣品加入后未混勻。解決方法:加樣后在混勻器上充分混勻。
3、酶標儀濾光片不對或輸入波長不對。解決方法:TMB顯色用450/630波長。
4、酶標儀測定重復性差。解決方法:校對酶標儀。
5、洗滌不正確。解決方法:洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時反應板面向下,垂直用力甩凈內(nèi)容物(可多甩幾次),在干凈、無或少塵的吸水材料上拍干。洗板機洗板時不應有堵孔,洗滌應充分。
6、溫育條件不一致(一次用水育,一次用恒溫箱)。解決方法:恒溫箱溫育較水浴顯色深, OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應控制在37℃。
其他常見問題及解決方法:
1、試劑盒超過期, 超過有效期的產(chǎn)品可能會產(chǎn)生很弱的信號; 試劑盒沒有按規(guī)定進行保存,受高溫影響;
解決方法:實驗前檢查試劑的組分及批號,確認試劑未過期。 不要將試劑盒長時間置于常溫下,按使用規(guī)定儲藏。
2、試劑、樣品用前未平衡至室溫
解決方法:從低溫冰箱中取出的試劑及樣品應置室溫平衡 20分鐘左右。
3、加入試劑的體積和時間有誤, 移液器計量不準,吸嘴內(nèi)水分太多或不清潔;
解決方法:確定所使用的試劑體積正確,加入時間適當。 校正移液器,移液器與吸嘴配合要緊密吻合。移液不宜太快,排放應*。
4、elisa定量檢測試劑盒洗板及加樣過程中,酶標受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力
解決方法:確認盛酶標的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認配制洗液的容器已洗干凈,確認配制洗液的純化水達到要求且未受污染。
檢查    140735-200501        10mg
鑒別及含量測定    140736-200501        10mg
HPLC法含量測定    140737-200501        10mg
HPLC法含量測定    140738-200501        40mg
HPLC法含量測定    140739-200501        40mg
檢查    140746-200801        10mg
鑒別    140747-201001        50mg
HPLC法含量測定    140749-200701        50mg
HPLC法含量測定    140750-200701        20mg
鑒別    140751-200701        6U
內(nèi)標物    140752-200601        0.3ml
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