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人腫瘤壞死因子βElisa Kit說明書

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更新時間:2019-03-19 13:39:47瀏覽次數(shù):192次

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產(chǎn)地 進口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
人腫瘤壞死因子βElisa Kit說明書檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..

公司人腫瘤壞死因子βElisa Kit說明書采用的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。點擊了解更多人elisa kit。

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人腫瘤壞死因子βElisa Kit說明書

 Human Tumor necrosis factor β,TNFβ ELISA Kit

48T/96T

人腫瘤壞死因子β(TNFβ)Elisa KitHuman Tumor necrosis factor β,TNFβ ELISA Kit
人腫瘤壞死因子βElisa Kit說明書【實驗用途】Tumor necrosis factor β,TNFβ,腫瘤壞死因子β。腫瘤壞死因子根據(jù)其產(chǎn)生來源和結(jié)構(gòu)不同,可分為TNF-α和TNF-β兩類。1985年Shalaby把巨噬細胞產(chǎn)生的TNF命名為TNF-α,把T淋巴細胞產(chǎn)生的淋巴毒素(lymphotoxin,LT)命名為TNF-β。TNF-β是一種淋巴因子,抗原和絲裂原均可刺激T淋巴細胞分泌TNF-β。PMA刺激RPMI1788B淋巴母細胞可分泌高水平TNF-β。TNF-α與TNF-β的生物學作用極為相似,這可能與分子結(jié)構(gòu)的相似性和受體的同一性有關(guān)。但在某些生物學作用方面也有不同之處。TNF-α和β發(fā)揮生物學效應的天然形式是同源的三聚體。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。


試劑配制:
1、人腫瘤壞死因子βElisa Kit說明書酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事項:
1加樣:
人腫瘤壞死因子βElisa Kit說明書實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
?現(xiàn)貨供應 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 脂肪酸去飽和酶2(FADS2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 脂肪酸去飽和酶3(FADS3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 脂肪酸合酶(FASN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 脂肪酸合酶(FASN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 脂肪酸合酶(FASN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 脂肪酸合酶(FASN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 層粘連蛋白β3(LAMβ3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 融合蛋白(FUS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 黑素轉(zhuǎn)鐵蛋白(MFI2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 視變誘導反應蛋白(OPTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 8-羥基鳥嘌呤糖苷酶1(OGG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應 尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
人腫瘤壞死因子βElisa Kit說明書小鼠抗mCherry標簽單抗-20℃保存Anti mCherry-Tag Mouse MAb現(xiàn)貨供應

小鼠抗S1標簽單抗-20℃保存Anti S1-Tag Mouse MAb現(xiàn)貨供應

小鼠抗SUMO標簽蛋白單抗-20℃保存Anti SUMO-Tag Mouse MAb現(xiàn)貨供應

小鼠抗T7標簽單抗-20℃保存Anti T7-Tag Mouse MAb現(xiàn)貨供應

小鼠抗Tag-100標簽蛋白單抗-20℃保存Anti Tag-100-Tag Mouse MAb現(xiàn)貨供應

小鼠抗V5標簽單抗-20℃保存Anti V5-Tag Mouse MAb現(xiàn)貨供應

小鼠抗VSV-G標簽單抗-20℃保存Anti VSV-G-Tag Mouse MAb現(xiàn)貨供應

小鼠粒細胞分離液1.128-20℃保存Cell Separation Solution現(xiàn)貨供應

小鼠淋巴細胞分離液1.092-20℃保存Cell Separation Solution現(xiàn)貨供應

小鼠內(nèi)皮細胞分離液1.071-20℃保存Cell Separation Solution現(xiàn)貨供應

小鼠胰島細胞分離液1.072-20℃保存Cell Separation Solution現(xiàn)貨供應
操作步驟:
1)人腫瘤壞死因子βElisa Kit說明書運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應當即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。

 

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