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產(chǎn)地 | 進口 | 加工定制 | 否 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
公司質(zhì)粒 ( 載體 ) 系列產(chǎn)品2μg說明書的RNA/DNA提取目錄有下面10個系列,5000余種產(chǎn)品:點擊了解更克隆及表達。
1、RNA純化系列產(chǎn)品
2、DNA純化系列產(chǎn)品
3、電泳及回收系列產(chǎn)品
4、探針標(biāo)記及檢測系列產(chǎn)品
5、核酸擴增系列產(chǎn)品
6、克隆表達系列產(chǎn)品
7、基因組研究系列產(chǎn)品
8、蛋白質(zhì)研究系列產(chǎn)品
9、細(xì)胞生物學(xué)研究系列產(chǎn)品
10、即用型溶液、質(zhì)粒庫、菌種庫等等
質(zhì)粒 ( 載體 ) 系列產(chǎn)品2μg說明書的詳細(xì)介紹:
DNA提取流程圖:?問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
質(zhì)粒 ( 載體 ) 系列產(chǎn)品2μg說明書稱答:回收得到的DNA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得 DNA 純度較好,如果洗脫時不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會偏低,因為pH 值和離子存在會影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長片段回收時應(yīng)注意哪些問題?
答:質(zhì)粒 ( 載體 ) 系列產(chǎn)品2μg說明書當(dāng)DNA 段長度較長(5 kb 以上)時,回收效率會有所下降,這是DNA 切膠回收時的常見現(xiàn)象。此時建議按以下方法解決問題:
1 適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點樣量;
2 由于長段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
3 減少操作過程中對長段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時不要將DNA 長時間暴露在紫外等下。
注意事項:
● 質(zhì)粒 ( 載體 ) 系列產(chǎn)品2μg說明書溶液PE *次使用前請按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對電泳使用的Agarose 種類沒有嚴(yán)格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點的Agarose 等。
● 電泳時請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當(dāng)延長電泳時間,在條帶分離清晰后進行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會影響后續(xù)試驗。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請嚴(yán)格按照操作步驟操作。
4-酰氧基它莫西芬 4-Acetoxy Tamoxifen 76117-69-6 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
4'-酰并-15-冠-5-醚(>95.0%(GC)) 4'-Acetylbenzo-15-crown 5-Ether 41757-95-3 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
4-氧度酸 4-Oxo Etodolac 111478-86-5 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
4-氧代維酰酚 3-Keto Fenretinide 865536-65-8 質(zhì)量規(guī)格:美國*
4-鹽酸差向四環(huán)素 4-Epitetracycline hydrochloride 23313-80-6 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
4-亞基惡唑 4-Nitroso Sulfamethoxazole 131549-85-4 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
4-溴芘(>95.0%(GC)) 4-Bromopyrene 1732-26-9 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
4-溴基-6,7-二氧基(>98.0%(HPLC)) 4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin 88404-25-5 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
4-基芘(>97.0%(HPLC)) 4-Nitropyrene 57835-92-4 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)
4-基鄰二腈(>98.0%(GC)) 4-Nitrophthalonitrile 31643-49-9 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
4-基惡唑 4-Nitro Sulfamethoxazole 29699-89-6 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
4-基兒茶酚 4-NITROCATECHOL 517432 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.0% ,標(biāo)準(zhǔn)品
4-基兒茶酚 4-NITROCATECHOL 517432 質(zhì)量規(guī)格:>98.0% ,進口分裝
4-基芐瞇鹽酸鹽 4-NitrobenziMidaMide HCl 15723-90-7 質(zhì)量規(guī)格:>97%
4-基-L-氨酸 4-Nitro-L-phenylalanine monohydrate 207591-86-4 質(zhì)量規(guī)格:0.98
4-烯氧基-2-羥基二酮(>97.0%(HPLC)(T)) 4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone 2549-87-3 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)
4-戊氧基醛(>98.0%(GC)) 4-Amyloxybenzaldehyde 5736-91-4 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
4-戊氧基二腈(>98.0%(GC)) 4-Pentyloxyphthalonitrile 106943-83-3 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
4'-戊基酮(>95.0%(GC)) 4'-Pentylacetophenone 37593-02-5 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
質(zhì)粒 ( 載體 ) 系列產(chǎn)品2μg說明書6-Desfluoro-6-hydroxyRisperidone規(guī)格:美國進口
6-Deoxypenciclovir規(guī)格:美國進口
6-Chloropurine規(guī)格:>98%,BR
6-Chloroimidazo[1,2-b]pyridazine規(guī)格:>98%
6-Chloroguanosine規(guī)格:>98%,BR
6-Carboxy-X-rhodamine;6-ROX規(guī)格:>95%
6-Carboxytetramethylrhodamine規(guī)格:≥90%;forfluorescence
6-CarboxyfluoresceinN-hydroxysuccinimideester規(guī)格:0.9
6-Carboxyfluorescein規(guī)格:0.95
6'-CarboxySimvastatin規(guī)格:美國進口
實驗步驟:
(1)質(zhì)粒 ( 載體 ) 系列產(chǎn)品2μg說明書實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提兩次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
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