當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>PCR相關(guān)試劑>>恒溫?cái)U(kuò)增系列>> Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)
HotStart Bst4.2 大規(guī)格(125ml包裝酶)
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品分類 | 規(guī)格 | 貨號 |
Bst 4.0 Basic Mix(with UDG) | 恒溫?cái)U(kuò)增系列 | 100T 2000Tx25μl | BJ-PJ6570 |
該制品為雙組分的試劑,Basic Buffer Mix 包含了反應(yīng)緩沖液、Mg2+、dU/A/C/GTP(不含 dTTP)、凍干賦形劑,酶 Mix 包含 Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶、熱敏 UDG。得益于 Bst 4.0 識別 dUTP 底物,反應(yīng)底物中不包含dTTP,因此擴(kuò)增產(chǎn)物均為 dUTP 產(chǎn)物,在配合熱敏 UDG的情況下,實(shí)現(xiàn)防污染性能。在實(shí)際測試中,含有 10e5Copies 的污染物的條件下,抑制污染擴(kuò)增。本制品尤其適用于開蓋的 LAMP 反應(yīng)(如試紙條檢測)、密封腔體(污染風(fēng)險(xiǎn)較高)的檢測試驗(yàn)(如定量 PCR腔體)。
試劑使用特點(diǎn):
(1)Basic Buffer Mix 中不含染料,可自行添加 SYBR Green、Eva Green 等染料進(jìn)行熒光檢測。
(2)本試劑適用于開蓋檢測如核酸試紙條檢測。
(3)試劑中含有凍干賦形劑,試劑可直接凍干,無需再優(yōu)化凍干配方。
儲存:-20℃保存 1 年;-80℃保存 2 年;短期使用放置于2-8℃,保存 1 個(gè)月。反復(fù)凍融 10 次,不影響使用。如有白色沉淀,于 37℃水浴放置 10min 后溶解沉淀,不影響使用。
使用方法:
1. 配制 LAMP 反應(yīng)體系
2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl
25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到總體積 25 μl
10xLAMP Primer Mix 濃度:FIP/BIP 分別為 16 μM、LoopF/B 分別為 4~8 μM、F3/B3 分別為 2 μM。
注意:如何應(yīng)用核酸試紙條進(jìn)行特異性檢測,可來信咨詢。
2. 反應(yīng)體系配好后,室溫(25-37°C)放置 2min,以消化去除潛在的核酸污染,隨后置于 65°C 進(jìn)行反應(yīng)15~30min。
試劑凍干策略(有凍干經(jīng)驗(yàn)人員操作):
1. 配制 LAMP 凍干體系
2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl
25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
ddH2O 到體積 1.5 μl
凍干總體積 15 μl
2. 體系配制完畢后,加入 0.2 ml EP 管進(jìn)行上機(jī)凍干。該試劑的凍干體積為 15 μl, 檢測反應(yīng)體積為 25 μl。
特別說明:
(1)本試劑防污染原理為:熱敏 UDG 消化去除含有 dUTP的擴(kuò)增產(chǎn)物,熱敏 UDG 在隨后 50℃以上迅速失活,并不影響后續(xù) LAMP 擴(kuò)增。因此,本試劑無法去除采用 dTTP擴(kuò)增的污染物,也不能消化天然的核酸底物(DNA/RNA)。為避免擴(kuò)增氣溶膠污染,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)長期使用本試劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn),一旦使用 dTTP 試劑擴(kuò)增后,造成實(shí)驗(yàn)室污染,采用本試劑不會消除假陽性擴(kuò)增。
(2)本試劑適用基于 OG 染料變色法、SYBR Green 法、基于 Biotin/FAM 探針的核酸膠體金法( 具有膠體金法特異性使用策略,如需技術(shù)支持,請來信咨詢)。本試劑不支持 HNB、pH 顯色法。其它使用策略自行優(yōu)化調(diào)整。
(3)基于本試劑, 提供凍干制備服務(wù)。八聯(lián)管起訂量 480T,凍干球起訂量 2000T。
下列是公司正在出售的產(chǎn)品:
鋅指蛋白399抗體 英文名;ZDHHC11/ZNF399 | 纖維蛋白原A鏈抗體 英文名;Fibrinogen alpha chain |
白介素-17E/白介素25抗體 英文名;IL17E | TRS31蛋白抗體 英文名;TRAPPC5 |
DENND2A蛋白抗體 | 淋巴細(xì)胞趨化因子抗體 |
磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體 英文名;Phospho-MEF2A (Ser408) | ATP依賴解旋酶DDX17抗體 |
DENND1C蛋白抗體 英文名;DENND1C | 酪蛋白激酶1γ2抗體 英文名;CSNK1G2 |
無毛發(fā)蛋白抗體 英文名;Hairless | ATP依賴解螺旋酶ETL1抗體 英文名;SMARCAD1 |
RNA結(jié)合蛋白16抗體 英文名;RBM16 | 肽酶抑制劑15抗體 英文名;PI-15 |
解旋酶SNF2L抗體 | PerCP-Cy5.5標(biāo)記人CD9單克隆抗體 英文名;human CD9/PerCP-Cy5.5 |
AF594標(biāo)記的網(wǎng)格蛋白重鏈抗體 | 肌酸激酶同工酶CKMB抗體 |
交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體 英文名;D-DIMER | 20號染色體開放閱讀框133抗體 |
AF594標(biāo)記的孤兒核受體蛋白Nur77抗體 英文名;Nur77, Alexa Fluor 594 conjugated | 肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基5重組兔單克隆抗體 英文名;ARPC5 |
線粒體核糖體蛋白L46抗體 | 20號染色體開放閱讀框132抗體 英文名;C20orf132 |
鋅指蛋白660抗體 | Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)磷酸化熱休克因子1(Ser326)抗體 |
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