當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>土壤系列>> 土壤過氧化氫酶(SCAT)測試盒紫外分光光度法
貨號 | BJ-01611290-2 |
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商品介紹:
測定意義:
S-CAT是土壤微生物代謝的重要酶類,在H2O2清除系統(tǒng)中具有重要作用。測定原理:H2O2在240nm下有特征吸收峰,通過測定與土壤反應(yīng)后溶液在此波長下吸光度的變化,即可反應(yīng)S-CAT活性的高低。需自備的儀器和用品:紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水 |
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
土壤過氧化氫酶(SCAT)測試盒紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/24樣 | BJ-01611290-2 |
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng):
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
纖維母生長因子5抗體噬尼古丁節(jié)桿菌炙黃芪LAMP鑒定試劑盒
脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF1抗體微紫青霉紫蘇葉LAMP鑒定試劑盒
感覺神經(jīng)蛋白1抗體蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種浙貝母LAMP鑒定試劑盒
線粒體型共濟(jì)失調(diào)蛋白抗體玉蕈、真姬菇人神經(jīng)ansuan酶(NA)Elisa測定試劑盒
FC段IgE受體α多肽抗體里氏木霉燈心草LAMP鑒定試劑盒
FAM81A蛋白抗體黃傘(10號)人N端外顯肽(Ext-N)Elisa測定試劑盒
FAM78B蛋白抗體短波單胞菌屬小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)Elisa測定試劑盒
9號染色體開放閱讀框59抗體枯草芽孢桿菌大鼠白介su7(IL-7)Elisa測定試劑盒
FAM76A蛋白抗體釀酒酵母大鼠間粘附分子2(ICAM-2/CD102)Elisa測定試劑盒
FAM76B蛋白抗體紫帶擬迷孔菌大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)Elisa測定試劑盒
FAM92A1蛋白抗體黑曲霉豬松弛肽/松弛su(RLN)Elisa測定試劑盒
FAM98A蛋白抗體球孢白僵菌豬膽囊收縮su/腸促肽(CCK)Elisa測定試劑盒
FRMD5蛋白抗體青枯假單胞菌豬腸三葉因子(ITF)Elisa測定試劑盒
FRMD6蛋白抗體解脂亞羅酵母豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)Elisa測定試劑盒
FAM161A蛋白抗體釀酒酵母豬食欲su受體(OXR)Elisa測定試劑盒
土壤過氧化氫酶(SCAT)測試盒紫外分光光度法血小板反應(yīng)蛋白2(TSP-2)試劑盒 Anti-TNFSF14 AntibodyCy5.5標(biāo)記的抗羊IgG
天青殺su1(AZU1)試劑盒 Anti-TNFSF18 AntibodyCy7標(biāo)記的抗羊IgG
白介su3介導(dǎo)核因子(NFIL3)試劑盒Anti-TNFSF4 Antibody生物su標(biāo)記的抗羊IgG
胃蛋白mei原C(PGC)試劑盒Anti-TNFSF8 Antibody羅丹明標(biāo)記的抗羊IgG
性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)試劑盒Anti-TNFSF8 Antibody性磷suan酶(AP)標(biāo)記的抗羊IgG
谷胱S-轉(zhuǎn)移酶θ1(GSTθ1/GSTt1)試劑盒Anti-TNFα AntibodyFITC標(biāo)記的抗羊IgG
補(bǔ)體因子I(CFI)試劑盒Anti-TNFα Antibody膠體金標(biāo)記的抗羊IgG
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