公司產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱：綿羊肺成纖維細胞（原代永生化）
產(chǎn)品英文代號：OAR-L1

細胞培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS+1%P/S

生長狀態(tài)：貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細胞STR鑒定：不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）：37

運輸溫度（℃）：常溫

運費基數(shù)：活細胞包郵/凍存100-400元干冰費

穩(wěn)定貨期（是or否）：     是

細胞培養(yǎng)及傳代：
<1>細胞培養(yǎng)
產(chǎn)品僅用于科研細胞請于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，大部分細胞是37℃，5% CO2，濕度環(huán)境下培養(yǎng)的。有極少部分細胞培養(yǎng)條件不行，請仔細閱讀相應的細胞說明書，使用正確的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件；
細胞于培養(yǎng)瓶或皿中培養(yǎng)，加入適量說明書上標注的細胞相應*培養(yǎng)基（一般液面高度2-3mm即可）。
<2>細胞傳代（以下步驟適用于10cm皿）
細胞培養(yǎng)至密度達80%以上時即可傳代，先將細胞培養(yǎng)基取出3mL用15mL離心管裝好，其他培養(yǎng)基全部吸干舍棄；
培養(yǎng)皿加入2-3mL無菌PBS，輕輕晃動皿，使PBS浸洗到皿底所有部位，PBS吸干舍棄；
加入1mL胰酶，輕輕晃動皿，使胰酶浸沒到皿底所有部位，將皿蓋好放入培養(yǎng)箱中消化；
3min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞不再貼壁，即可加入*步收集的培養(yǎng)基混勻；
若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至不貼壁為止；
將細胞懸液均勻分成幾份，分別加入不同培養(yǎng)皿中，補加新培養(yǎng)基后放回培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
<3>相關(guān)問題
部分細胞在傳代后時，會有以下現(xiàn)象：細胞內(nèi)會有黑色小點、細胞間隙有些顆粒物、培養(yǎng)基漂浮一些死細胞或者細胞長的極慢。出現(xiàn)以上現(xiàn)象時，可以咨詢本公司技術(shù)人員此現(xiàn)象是否正常及相關(guān)處理方式，不要頻繁換液，大多數(shù)細胞1周換液2-3次即可。
細胞碎片較多、背景較臟時，貼壁細胞用PBS漂洗兩次、懸浮細胞打散后低速離心（900rpm，3min）能有效改善。
傳代比例建議1:2-1:3，長得比較快的細胞可以1：3，比較慢的按1:2傳代。傳代后，建議不要使用傳代前培養(yǎng)所使用的培養(yǎng)基，會有大量細胞碎片甚至導致細胞死亡的風險。
細胞狀態(tài)不好或者生長極慢的時候，可以通過增加血清濃度調(diào)整細胞狀態(tài)及生長速度。
請不要隨意更換培養(yǎng)基，因?qū)嶒炐枰?，可以逐步馴化。
懸浮傳代：混勻細胞，收集細胞懸液900-1000rpm離心3min，棄上清。再加5ml PBS重懸細胞，再離心后，用*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時碎片比較少，傳代時可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗一次。

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細胞凍存步驟： 
   待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml*培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。明舟生物按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
復蘇細胞步驟：    將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
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細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
產(chǎn)品僅用于科研在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備 
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象
乙基丙二酸腦病變基因1(ETHE1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　AR　可可鏈霉菌可可亞種　25g

延長蛋白4(ELP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　地衣芽胞桿菌　100mg

延長蛋白3(ELP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　蘇云金芽胞桿菌日本亞種　1g

Myoferlin蛋白(MYOF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　地生翅孢殼　500mg

Kindlin 2蛋白(KIND2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　根瘤菌　5g

磷酸神經(jīng)膜蛋白(PLM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　AR,≥98.0%((HPLC))　馬腺疫鏈球菌獸疫亞種　25g

多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶1(GALNT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　AR,≥98.0%((HPLC))　解淀粉芽孢桿菌　5g

多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶2(GALNT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　枯草芽孢桿菌　25g

多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶3(GALNT3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　扣囊復膜孢酵母　5g

多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶4(GALNT4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　宇佐美曲霉　100g

多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶6(GALNT6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　黑曲霉　25g

腎胱素7(NPHP7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　枯草芽胞桿菌　5g

顆粒酶H(GZMH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥97%　盔狀畢赤酵母　5MG

Cupidin蛋白(CPD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　大腸埃希菌　25g

Jagged 2蛋白(JAG2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　嗜冷生孢八疊球菌　5g

Laforin蛋白(LDE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥97% (HPCE)　發(fā)根土壤桿菌（發(fā)根植物單胞菌）（現(xiàn)1）　5mg

Tricellulin蛋白(TRIC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　灰毛青霉　100g

Muskelin 1蛋白(MKLN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　褐黃木耳（琥珀木耳）　25g
綿羊肺成纖維細胞（原代永生化）規(guī)格人體組織源Human Cancer: Cervical Cancer Tissues Cells Derivatives人體組織源細胞提取物是從人體組織源細胞提取的，人體組織源細胞從人體組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

人抗IVIgG抗體ELISA試劑盒CD45 (D9M8I) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 700 Conjugate)100 ul

人抗胰島素受體抗體(AIRA)ELISA試劑盒 Dvl3 Antibody20 ul

人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒 Dvl3 Antibody100 ul

人抗IgE受體抗體ELISA試劑盒TRAIL (C92B9) Rabbit mAb100 ul

人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)ELISA試劑盒 Ret Antibody100 ul

人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒Phospho-Ret (Tyr905) Antibody100 ul

人抗丁型肝炎病毒抗體(anti-HDV)ELISA試劑盒 Ret (C31B4) Rabbit mAb100 ul

人抗乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒 Dvl2 (30D2) Rabbit mAb20 ul
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線。