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乙酸激酶(ACK)測試盒微量法

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產(chǎn)品型號

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所  在  地上海市

更新時間:2022-08-19 14:00:55瀏覽次數(shù):122次

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貨號 BJ-01611350-1
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分離溶體純度標(biāo)志組織D法檢測試劑盒20次小鼠垂體瘤(分泌促生長激分泌激);AtT-20小鼠脂絲氨(P

商品介紹:

測定意義:                          

ACK主要存在于微生物中,催化乙酸和ATP生成乙酰磷酸和ADP,是細菌碳代謝和能量代謝的關(guān)鍵酶,尤其是在古細菌甲烷合成代謝中起著中樞作用。

測定原理:

(1)ACK催化乙酸鈉和ATP生成乙酰磷酸和ADP,(2)丙酮酸激酶催化ADP和PEP生成ATP和丙酮酸,(3)乳酸脫氫酶催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD+,(4)在340nm下測定NADH氧化生成NAD+速率,即可反映ACK活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

乙酸激酶(ACK)測試盒微量法

微量法

100管/96樣

BJ-01611350-1

10.png 

測定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。

注意事項:

待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。

一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

優(yōu)點如下:

1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。

5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗: X =103.3%。

7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強。

8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

羥類固脫氫酶17β3抗體鵝膏菌屬D-葡萄糖-6-磷suan二鈉鹽

羥基類固脫氫酶11β1抗體丁香輪絲鏈輪絲菌D-半乳糖

滋養(yǎng)層抗原3β-HSD抗體土壤小單胞菌麥芽糖一水合物

乙?;M蛋白H4抗體黑木耳多聚半乳糖醛suan

suan化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1*喜溫suan硫桿菌巰基乙suan

附睪分泌蛋白4抗體菌核鏈霉菌1-甲基-2-吡咯烷酮

三甲基化組蛋白H3抗體腐爛粘束梗霉角鯊?fù)?/span>

三羥基三甲基fu酶A還原酶抗體棒曲霉磷suan三正丁酯

suan乙酰肝su蛋白多糖2球孢白僵菌2,5-二苯惡唑

肝癌相關(guān)抗原hca25a金9401(金針菇)壬suan

己糖激酶3抗體名稱鎳箔

人乙肝病pre S1/S2蛋白抗體黃柄曲霉木香揮發(fā)油

人乙肝病pre S1蛋白抗體黑曲霉毛兩面針su

己糖激酶1抗體盾殼霉松脂二葡萄糖苷

己糖激酶2抗體釀酒酵母5-羥色鹽suan鹽
乙酸激酶(ACK)測試盒微量法乙酰酯酶關(guān)聯(lián)蛋白(ACHAP)試劑盒  Anti-B3GNT2 Antibody戊型肝炎?。乖?/span>

乙酰酯酶(AChE)試劑盒  Anti-B4GALNT1 Antibody庚型肝炎?。乖?/span>

信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子1(STAT1)試劑盒Anti-B4GALNT1 Antibody聚組ansuan標(biāo)簽蛋白

Apelin蛋白(APLN)試劑盒Anti-B4GALT3 Antibody艾滋病?。乖?/span>

信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)試劑盒Anti-B4GALT1 Antibody熱休克蛋白-60(抗原)

食欲su/阿立新A(OXA)試劑盒Anti-B4GALT3 Antibody熱休克蛋白-70(多肽抗原)

核孔蛋白133kda(NUP133)試劑盒Anti-B4GALT5 Antibody銜接蛋白α抗原


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