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214次進口elisa試劑盒基本原理及注意事項
⒈正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
⒉在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
⑴固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。當前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
⑵包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
⑶酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
⑷酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是當前較為滿意的供氫體。遠慕生物ELISA試劑盒 底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
進口elisa試劑盒苗條素受體(Leptin receptor)ELISA試劑盒 ,英文名: Leptin receptor ELISA Kit
苗條素(OB)ELISA試劑盒 ,英文名: OB ELISA Kit
苗條素(LEP)ELISA試劑盒 ,英文名: LEP ELISA Kit
粒細胞趨化蛋白2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒 ,英文名: GCP-2/CXCL6 ELISA Kit
粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)ELISA試劑盒 ,英文名: GMCSF/CSF2 ELISA Kit
可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA試劑盒 ,英文名: ENG/sCD105 ELISA Kit
可溶性CD80(sCD80/B7-1)ELISA試劑盒 ,英文名: sCD80/B7-1 ELISA Kit
可溶性CD80(sCD80)ELISA試劑盒 ,英文名: sCD80 ELISA Kit
巨細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒 ,英文名: GM-CSF ELISA Kit
巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒 ,英文名: MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit
巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)ELISA試劑盒 ,英文名: MCP-1/CCL2 ELISA Kit
活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒 ,英文名: Activin-A ELISA Kit
核心蛋白聚糖(DCN)ELISA試劑盒 ,英文名: DCN ELISA Kit
胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 ,英文名: Cys-C ELISA Kit
骨成型蛋白5(BMP-5)ELISA試劑盒 ,英文名: BMP-5 ELISA Kit
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二肽基肽酶IV(DPP4/CD26)ELISA試劑盒 ,英文名: DPP4/CD26 ELISA Kit
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凋亡相關(guān)因子(Fas/Apo-1/CD95)ELISA試劑盒 ,英文名: Fas/Apo-1/CD95 ELISA Kit
淀粉樣前體蛋白(APP)ELISA試劑盒 ,英文名: APP ELISA Kit
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成纖維細胞生長因子9(FGF9)ELISA試劑盒 ,英文名: FGF9 ELISA Kit
成纖維細胞生長因子23(FGF-23)ELISA試劑盒 ,英文名: FGF-23 ELISA Kit
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