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216次elisa檢測試劑盒樣本收集及保存紀寧生物提幾點建議:
1.嚴重溶血,以HRP為標記的ELISA測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性;
2.混有紅細胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應:
3.標本凝固不全,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;
4.采血試管洗滌不*、反復使用易交叉污染:塑料試管能吸附抗原物質(zhì),樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。
實驗需求留意問題
1.樣品稀釋
一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均經(jīng)過很多實驗斷定,以確保實驗的靈敏度和特異性.酶聯(lián)免疫反響是一種敏感性很高的反響,如果血清不稀釋,不行防止會發(fā)生很強的非特異性反響,呈現(xiàn)假陽性.
2.試劑盒平衡
Elisa中一切試劑和板條均應在實驗前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上.平衡時刻太短會形成試劑混勻不行,樣品孵育時刻相對縮短,ELISA反響不行充沛.冬天室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘.
3.顯色
顯色必定要操控時刻,依據(jù)試劑盒闡明操作即可.一般來說,顯色時刻過短,成果偏低;顯色時刻過長,空白增高或許非特異性顯色添加.
4.比色
比色要留意波長的挑選.以TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用,而前者比色波長為450nm,后者為492nm,濾光片需依據(jù)要求隨時替換.因而,簡單呈現(xiàn)濾光片錯用的問題.
5.樣品和試劑的混勻
在稀釋前、后的樣品有必要充沛混勻,一切試劑在加樣前也須搖勻,以確保實驗的均一性.
6.加樣
加樣是一項很重要的過程.加樣不行太快,要防止加在孔壁上部,不行濺出和發(fā)生氣泡.加樣太快,無法確保微量加樣的準確性和均一性.加在孔壁上部的非包被區(qū),易導致非特異吸附.
7.溫育
溫育是ELISA測定中影響測定勝敗zui為要害的一個要素.ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結(jié)合反響在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合,有必要在必定的溫度條件下反應必定的時刻.
8.洗板
固相免疫測定技能是一種非均相免疫測定技能,需以洗刷操作將特異結(jié)合于固相的抗原或抗體與反響溫育過程中吸附的非特異成份別離開來,以確保ELISA測定的特異性.洗液盡量不要溢出孔外;加洗液后要靜置1分鐘,甩去板孔中洗液后,必定要大力拍干;及時替換吸水紙,尤其是拍過酶標記物的吸水紙必定要棄去,不然可能影響實驗成果.
elisa檢測試劑盒小鼠干燥綜合征抗原B(SSB)ELISA試劑盒 ,英文名: SSB ELISA Kit
小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒 ,英文名: SCF/MGF ELISA Kit
小鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 ,英文名: IP-10/CXCL10 ELISA Kit
小鼠干擾素調(diào)節(jié)因子5(IRF5)ELISA試劑盒 ,英文名: IRF5 ELISA Kit
小鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒 ,英文名: HL ELISA Kit
小鼠肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)ELISA試劑盒 ,英文名: L-FABP ELISA Kit
小鼠肝細胞生長因子激活物(HGFAC)ELISA試劑盒 ,英文名: HGFAC ELISA Kit
小鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒 ,英文名: HGF ELISA Kit
小鼠甘油三酯(TG)ELISA試劑盒 ,英文名: TG ELISA Kit
小鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH/G3PDH)ELISA試劑盒 ,英文名: GAPDH/G3PDH ELISA Kit
小鼠甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)ELISA試劑盒 ,英文名: MBL ELISA Kit
小鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)ELISA試劑盒 ,英文名: CALP ELISA Kit
小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISA試劑盒 ,英文名: CCB ELISA Kit
小鼠鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒 ,英文名: CAM ELISA Kit
小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒 ,英文名: CR ELISA Kit
小鼠鈣非依賴型磷脂酶A2(iPLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: iPLA2 ELISA Kit
小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒 ,英文名: sIgA ELISA Kit
小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: sPLA2 ELISA Kit
小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒 ,英文名: PARC/CCL18 ELISA Kit
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