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167次膽囊收縮素(CCK)檢測試劑盒操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
900ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
450ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
225ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
112.5ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
56.25ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
樣品收集、處理及保存
1.細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2.細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3.血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5.體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7.樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8.保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
膽囊收縮素(CCK)檢測試劑盒* 大鼠纖連蛋白(FN)ELISA Kit,48T/96T
進口/國產(chǎn) 人FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt-3L)ELISA Kit,48T/96T
進口/原裝 小鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA Kit,48T/96T
進口/分裝 大鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA Kit,48T/96T
* 人FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA Kit,48T/96T
進口/國產(chǎn) 小鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA Kit,48T/96T
進口/原裝 大鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA Kit,48T/96T
進口/分裝 人趨化因子(FK)ELISA Kit,48T/96T
* 小鼠趨化因子(FK)ELISA Kit,48T/96T
進口/國產(chǎn) 大鼠趨化因子(FK)ELISA Kit,48T/96T
進口/原裝 人中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA Kit,48T/96T
進口/分裝 小鼠中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA Kit,48T/96T
* 大鼠中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA Kit,48T/96T
進口/國產(chǎn) 人粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA Kit,48T/96T
進口/原裝 小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA Kit,48T/96T
進口/分裝 大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA Kit,48T/96T
* 人膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA Kit,48T/96T
進口/國產(chǎn) 小鼠膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA Kit,48T/96T
進口/原裝 大鼠膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA Kit,48T/96T
膽囊收縮素(CCK)檢測試劑盒
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