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76次脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)ELISA試劑盒標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
12nmol/L 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6nmol/L 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3nmol/L 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5nmol/L 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0.75nmol/L 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)ELISA試劑盒測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
4-芐氧基苯酚 號(hào): 103-16-2
4-甲基-1,2,3-噻二唑-5-羧酸 號(hào): 18212-21-0
4-甲基-1,2,3-噻重氮-5-羧酸乙酯 號(hào): 18212-20-9
4-甲基-1,2,3-噻重氮-5-甲酰胺 號(hào): 175136-67-1
4-甲基-1,2,3-噻二唑-5-羧酸酰肼 號(hào): 75423-15-3
4-甲氧基喹啉 號(hào): 607-31-8
4-甲氧基異喹啉 號(hào): 36034-54-5
4-甲氧基吲哚-2-羧酸 號(hào): 103260-65-7
4-氯-6-氨基喹啉 號(hào): 1085192-91-1
4-氯-6-甲氧基喹啉 號(hào): 4295/4/9
4-氯-6-甲氧基喹啉-3-甲酸乙酯 號(hào): 22931-71-1
3-氯喹啉 號(hào): 612-59-9
3-羥基喹啉 號(hào): 580-18-7
3-氰基-4-甲基吡啶 號(hào): 5444/1/9
2-氟苯乙基溴 號(hào): 91319-54-9
4-氨基-3-溴喹啉 號(hào): 36825-36-2
3-溴吡唑并[1,5-A]吡啶 號(hào): 1464960
2,3,5-三氯-4,6-二氟吡啶 號(hào): 34415-31-1
4,6-二氯喹啉 號(hào): 4203-18-3
4,6-二羥基喹啉 號(hào): 3517-61-1
4,6-二溴喹啉 號(hào): 927801-13-6
脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)ELISA試劑盒
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