ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在科研領(lǐng)域上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。現(xiàn)將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟發(fā)，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因及解決辦法分析：

1 選擇試劑

選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。

2 加樣可能原因：

1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；

2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長（特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)）；

3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。

ELISA試劑盒解決辦法：

1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。

2） 加樣后及時(shí)放入孵箱。

3） 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。

4） 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。

5） 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。