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DAB染色液的使用方法:
1.DAB顯色液配制 10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基聯(lián)苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,顯色時(shí)加入5-10mL 30%H2O2 混勻后立即使用
2. 顯色 準(zhǔn)備好含有待測(cè)蛋白的固相膜:包括電泳、轉(zhuǎn)印、封阻、一抗(或生物su)處理、辣根過氧化酶(HRP)標(biāo)記的二抗(或鏈霉親和素)處理、清洗等步驟。
3.加入適量的DAB顯色液,鋪滿整個(gè)固相膜表面(可按比例增減)。
4. 置于平式搖蕩儀上,在室溫下孵育2至5分 鐘,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出現(xiàn)。
5.用鑷子夾起固相膜,放進(jìn)無離子水里清洗。
6.空氣中晾干。
7. 拍照記錄 。
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